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HT22
ティッシュ
脳、海馬
同義語
HT-22

HT22

Cell line · 製品番号 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

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01概要

説明

HT22細胞株は、マウス海馬のHT4細胞由来の不死化サブクローンであり、神経薬理学研究において極めて重要である。温度感受性SV40 T抗原によるマウス神経組織の不死化によって生まれたHT22細胞は、アルツハイマー病、ハンチントン病、パーキンソン病などの神経変性疾患において重要な役割を果たしているグルタミン酸誘導性細胞毒性の基礎となるメカニズムを研究するためのユニークなin vitroモデルを提供している。

HT22細胞は神経細胞の表現型を示し、認知、学習、記憶のような重要な脳機能に関与する必須の興奮性神経伝達物質であるグルタミン酸に対して非常に感受性が高い。しかし、グルタミン酸の過剰摂取は、グルタミン酸毒性や神経細胞の過剰興奮を引き起こし、酸化ストレスやアポトーシスを含むメカニズムによって細胞損傷や細胞死を引き起こす。

HT22マウス海馬細胞は、イソフルラン曝露の影響を調べるような神経毒性研究、クロマチンランドスケープとエピジェネティックシグネチャーの探索、海馬神経新生に対するセロトニン作動性入力の影響の検討などに用いられている。後者には、セロトニン再取り込み阻害剤の研究、抗うつ薬スクリーニングにおけるその役割、神経細胞機能に対するセロトニントランスポーター(SERT)のグリコシル化の影響などが含まれる。

HT22細胞株は、グルタミン酸に対するよく特徴的な反応を示し、セロトニン作動系を研究する上で有用であることから、神経薬理学の進歩や様々な神経疾患に対する治療法の開発において、貴重なツールであり続けている。

ティッシュ
脳、海馬
同義語
  • HT-22

02分類

生物
マウス
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮

04識別子

引用
HT22(Cytion カタログ番号 305158)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_0321

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、50%基礎培地+40%FBS+10%DMSO、またはCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用する。この培地には、回復を促進し、凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤が含まれている。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。