الانتقال إلى المحتوى
HT22
الأنسجة
الدماغ، الحصين
المرادفات
HT-22

المستندات

HT22

Cell line · رقم المنتج 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يعتبر خط الخلايا HT22، وهو سلالة فرعية خالدة مشتقة من خلايا HT4 من حصين الفأر، محورياً في أبحاث علم الأدوية العصبية. تقدم خلايا HT22، التي نشأت من خلال تخليد الأنسجة العصبية للفأر باستخدام مستضد SV40 T-antigen الحساس لدرجة الحرارة، نموذجًا فريدًا في المختبر لدراسة الآليات الكامنة وراء السمية الخلوية التي يسببها الغلوتامات، والتي تلعب دورًا مهمًا في الاضطرابات العصبية التنكسية مثل مرض الزهايمر وهنتنغتون وباركنسون.

تُظهر خلايا HT22 نمطًا ظاهريًا عصبيًا وحساسة للغاية للغلوتامات، وهو ناقل عصبي مثير أساسي يشارك في وظائف الدماغ الحرجة مثل الإدراك والتعلم والذاكرة. ومع ذلك، يمكن أن يؤدي الإفراط في تناول الغلوتامات إلى سمية الغلوتامات والإفراط في إثارة الخلايا العصبية، مما يتسبب في تلف الخلايا أو موتها من خلال آليات تتضمن الإجهاد التأكسدي وموت الخلايا المبرمج.

يتم استخدام خلايا الحصين في الفأر HT22 في دراسات السمية العصبية، مثل تلك التي تفحص آثار التعرض للأيزوفلوران، لاستكشاف المشهد الكروماتيني والتوقيعات اللاجينية وفحص آثار مدخلات السيروتونين على التوليد العصبي للحصين. ويشمل هذا الأخير دراسة مثبطات إعادة امتصاص السيروتونين ودورها في فحص مضادات الاكتئاب، بالإضافة إلى تأثير ناقل السيروتونين (SERT) على وظيفة الخلايا العصبية.

لا يزال خط الخلية HT22، باستجابته المميزة جيداً للغلوتامات وفائدته في دراسة نظام السيروتونين، أداة قيّمة في تطوير علم الأدوية العصبية وتطوير علاجات لمجموعة من الاضطرابات العصبية.

الأنسجة
الدماغ، الحصين
المرادفات
  • HT-22

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة

04المعرّفات

المرجع
HT22 (رقم الكتالوج لدى شركة Cytion: 305158)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0321

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.