Μετάβαση στο περιεχόμενο
HT22
Ιστός
Εγκέφαλος, ιππόκαμπος
Συνώνυμα
HT-22

Έγγραφα

HT22

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά HT22, ένας αθάνατος υποκλώνος που προέρχεται από τα κύτταρα HT4 του ιππόκαμπου των ποντικών, είναι ζωτικής σημασίας στη νευροφαρμακολογική έρευνα. Προερχόμενα από την αθανατοποίηση νευρωνικών ιστών ποντικού με ένα ευαίσθητο στη θερμοκρασία SV40 Τ-αντιγόνο, τα κύτταρα HT22 προσφέρουν ένα μοναδικό in vitro μοντέλο για τη διερεύνηση των μηχανισμών που διέπουν την επαγόμενη από γλουταμικό κυτταροτοξικότητα, η οποία διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στις νευροεκφυλιστικές διαταραχές όπως η νόσος του Alzheimer, η νόσος του Huntington και η νόσος του Parkinson.

Τα κύτταρα HT22 εμφανίζουν νευρωνικό φαινότυπο και είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα στο γλουταμικό, έναν βασικό διεγερτικό νευροδιαβιβαστή που εμπλέκεται σε κρίσιμες εγκεφαλικές λειτουργίες όπως η νόηση, η μάθηση και η μνήμη. Ωστόσο, η υπερβολική πρόσληψη γλουταμινικού μπορεί να οδηγήσει σε τοξικότητα του γλουταμινικού και σε υπερδιέγερση των νευρικών κυττάρων, προκαλώντας κυτταρική βλάβη ή θάνατο μέσω μηχανισμών που περιλαμβάνουν οξειδωτικό στρες και απόπτωση.

Τα κύτταρα του ιππόκαμπου ποντικού HT22 χρησιμοποιούνται σε μελέτες νευροτοξικότητας, όπως αυτές που εξετάζουν τις επιδράσεις της έκθεσης σε ισοφλουράνιο, για τη διερεύνηση του τοπίου της χρωματίνης και των επιγενετικών υπογραφών και για τη διερεύνηση των επιδράσεων της σεροτονινεργικής εισόδου στη νευρογένεση του ιππόκαμπου. Το τελευταίο περιλαμβάνει τη μελέτη των αναστολέων επαναπρόσληψης σεροτονίνης και του ρόλου τους στον αντικαταθλιπτικό έλεγχο, καθώς και την επίδραση της γλυκοζυλίωσης του μεταφορέα σεροτονίνης (SERT) στη νευρωνική λειτουργία.

Η κυτταρική σειρά HT22, με την καλά χαρακτηρισμένη απόκρισή της στο γλουταμικό και τη χρησιμότητά της στη μελέτη του σεροτονινεργικού συστήματος, εξακολουθεί να αποτελεί πολύτιμο εργαλείο για την πρόοδο της νευροφαρμακολογίας και την ανάπτυξη θεραπειών για μια σειρά νευρολογικών διαταραχών.

Ιστός
Εγκέφαλος, ιππόκαμπος
Συνώνυμα
  • HT-22

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HT22 (αριθμός καταλόγου Cytion 305158)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0321

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε 50% βασικό μέσο + 40% FBS + 10% DMSO ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.