HT22
Cell line · Numer produktu 305158
The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...
Dostosowanie / Zalecenia
- HT22Cell line€800.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa HT22, unieśmiertelniony podklon pochodzący z komórek HT4 mysiego hipokampa, ma kluczowe znaczenie w badaniach neurofarmakologicznych. Powstałe w wyniku unieśmiertelnienia mysich tkanek neuronalnych za pomocą wrażliwego na temperaturę antygenu SV40 T, komórki HT22 oferują unikalny model in vitro do badania mechanizmów leżących u podstaw cytotoksyczności indukowanej glutaminianem, która odgrywa istotną rolę w zaburzeniach neurodegeneracyjnych, takich jak choroby Alzheimera, Huntingtona i Parkinsona.
Komórki HT22 wykazują fenotyp neuronów i są bardzo wrażliwe na glutaminian, niezbędny neuroprzekaźnik pobudzający zaangażowany w krytyczne funkcje mózgu, takie jak funkcje poznawcze, uczenie się i pamięć. Jednak nadmierne spożycie glutaminianu może prowadzić do toksyczności glutaminianu i nadmiernego pobudzenia komórek nerwowych, powodując uszkodzenie lub śmierć komórek poprzez mechanizmy obejmujące stres oksydacyjny i apoptozę.
Komórki hipokampa myszy HT22 są wykorzystywane w badaniach neurotoksyczności, takich jak te badające wpływ ekspozycji na izofluran, do badania krajobrazu chromatyny i sygnatur epigenetycznych oraz do badania wpływu serotoninergicznego na neurogenezę hipokampa. To ostatnie obejmuje badanie inhibitorów wychwytu zwrotnego serotoniny i ich roli w badaniach przesiewowych leków przeciwdepresyjnych, a także wpływu glikozylacji transportera serotoniny (SERT) na funkcjonowanie neuronów.
Linia komórkowa HT22, z dobrze scharakteryzowaną odpowiedzią na glutaminian i jej użytecznością w badaniu układu serotoninergicznego, nadal jest cennym narzędziem w rozwoju neurofarmakologii i opracowywaniu metod leczenia szeregu zaburzeń neurologicznych.
- Chusteczka
- Mózg, hipokamp
- Synonimy
- HT-22
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mysz
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Nabłonek
04Identyfikatory
- Źródło
- HT22 (numer katalogowy Cytion 305158)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0321
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
