Gå direkt till innehållet
HT22
Vävnad
Hjärna, hippocampus
Synonymer
HT-22

HT22

Cell line · Produktnummer 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen HT22, en odödliggjord subklon som härrör från HT4-celler i musens hippocampus, är central inom neurofarmakologisk forskning. HT22-cellerna har sitt ursprung i immortalisering av neuronala vävnader från möss med ett temperaturkänsligt SV40 T-antigen och utgör en unik in vitro-modell för att undersöka de mekanismer som ligger bakom glutamatinducerad cytotoxicitet, som spelar en viktig roll vid neurodegenerativa sjukdomar som Alzheimers, Huntingtons och Parkinsons sjukdomar.

HT22-celler har en neuronal fenotyp och är mycket känsliga för glutamat, en essentiell excitatorisk neurotransmittor som är involverad i kritiska hjärnfunktioner som kognition, inlärning och minne. Överdrivet intag av glutamat kan dock leda till glutamattoxicitet och överexcitering av nervceller, vilket orsakar cellskador eller celldöd genom mekanismer som involverar oxidativ stress och apoptos.

Hippocampusceller från HT22-musen används i neurotoxicitetsstudier, t.ex. för att undersöka effekterna av isofluranexponering, för att utforska kromatinlandskapet och epigenetiska signaturer och för att undersöka effekterna av serotonerg tillförsel på hippocampusneurogenesen. Det senare inkluderar studier av serotoninåterupptagshämmare och deras roll i screening av antidepressiva medel, samt effekterna av glykosylering av serotonintransportörer (SERT) på neuronal funktion.

HT22-cellinjen, med sitt väl karakteriserade svar på glutamat och sin användbarhet för att studera det serotonerga systemet, fortsätter att vara ett värdefullt verktyg för att främja neurofarmakologin och utvecklingen av behandlingar för en rad neurologiska sjukdomar.

Vävnad
Hjärna, hippocampus
Synonymer
  • HT-22

02Klassificering

Organism
Mus
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
HT22 (Cytion katalognummer 305158)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.