Pereiti prie turinio
KMS-12-BM
Audinys
Kaulų čiulpai
Liga
Daugybinė mieloma
Sinonimai
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumentai

KMS-12-BM

Cell line · Prekės numeris 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KMS-12-BM ląstelių linija - tai žmogaus mielomos ląstelių linija, sukurta iš paciento, sergančio daugybine mieloma, kaulų čiulpų. Ši ląstelių linija atstovauja nesubrendusiai plazmacitoidinei B ląstelių diferenciacijos stadijai, kuriai būdinga paviršiaus žymenų CD20, CD38 ir PCA-1 raiška, tačiau nėra imunoglobulinų gamybos. Ląstelės išsiskiria iškreipta morfologija, daugeliui jų būdingi daugiabranduoliai ir milžiniški požymiai. Ultrastruktūriniu požiūriu KMS-12-BM ląstelės turi gerai išsivysčiusį šiurkštų endoplazminį tinklą ir ovalios formos ekscentriškus branduolius su periferiniu chromatino pasiskirstymu, būdingu plazmacytoidinėms ląstelėms.

KMS-12-BM ląstelėms būdinga chromosominė anomalija, ypač abipusė translokacija t(11;14)(q13;q32), kuri dažnai siejama su daugine mieloma. Šios ląstelės taip pat pasižymi plačiu chromosomų skaičiaus diapazonu - nuo hipodiploidinių iki poliploidinių, o tai rodo didelį genomo nestabilumą. Skirtingai nuo savo kolegos KMS-12-PE, KMS-12-BM linija negamina amilazės, be to, ji neišskiria imunoglobulinų ir neturi jų paviršiaus raiškos, todėl tinka tyrimams, susijusiems su imunoglobulinų neprodukuojančia mieloma. Be to, ji pasižymi mažu klonavimo efektyvumu minkštojo agaro kultūrų sąlygomis - susidaro mažiau nei 0,1 % kolonijų, o įšvirkšta nuogoms pelėms neturi navikinių savybių.

Audinys
Kaulų čiulpai
Liga
Daugybinė mieloma
Sinonimai
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalios ląstelės
Ląstelių tipas
B ląstelė
Tumorogeninis
Nėra tumorigeniškas nuogoms pelėms

04Identifikatoriai

Nuoroda
KMS-12-BM (Cytion katalogo numeris 300287)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Išraiška ir jautrumas

Paviršiaus antigenai
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutacijų profilis
Translokacija: t(11;14)(q13;q32)
Produktai
Nėra imunoglobulinų gamybos

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 5 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 3 x 105 iki 1 x 106 ląstelių/ml.
Sėjos tankis
5 x 105 ląstelių/ml
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
64 metai
Etninė priklausomybė
Japonų