Prejsť na obsah
KMS-12-BM
Tkanivo
Kostná dreň
Choroba
Mnohopočetný myelóm
Synonymá
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumenty

KMS-12-BM

Cell line · Číslo výrobku 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia KMS-12-BM je ľudská myelómová bunková línia vytvorená z kostnej drene pacienta s neprodukujúcim mnohopočetným myelómom. Táto bunková línia predstavuje nezrelé plazmacytoidné štádium diferenciácie B-buniek, ktoré je charakterizované expresiou povrchových markerov CD20, CD38 a PCA-1, ale chýba produkcia imunoglobulínov. Bunky sa vyznačujú deformovanou morfológiou, pričom mnohé z nich majú viacjadrové a obrovské znaky. Ultraštruktúrne majú bunky KMS-12-BM dobre vyvinuté drsné endoplazmatické retikulum a vajcovité excentrické jadrá s periférnym rozložením chromatínu, typickým pre plazmacytoidné bunky.

Bunky KMS-12-BM vykazujú chromozomálnu abnormalitu, najmä recipročnú translokáciu t(11;14)(q13;q32), ktorá sa často spája s mnohopočetným myelómom. Tieto bunky tiež vykazujú široký rozsah počtu chromozómov, od hypodiploidných až po polyploidné, čo poukazuje na významnú genomickú nestabilitu. Na rozdiel od svojho náprotivku KMS-12-PE línia KMS-12-BM neprodukuje amylázu a chýba jej sekrécia imunoglobulínov alebo povrchová expresia, čo ju robí vhodnou na štúdie zahŕňajúce myelóm neprodukujúci imunoglobulíny. Okrem toho vykazuje nízku účinnosť klonovania v podmienkach mäkkej agarovej kultúry s tvorbou menej ako 0,1 % kolónií a nemá žiadne nádorové vlastnosti pri injekčnom podávaní nahým myšiam.

Tkanivo
Kostná dreň
Choroba
Mnohopočetný myelóm
Synonymá
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Okrúhle bunky
Typ bunky
B bunka
Tumorigenický
Nie je tumorogénny u nahých myší

04Identifikátory

Citácia
KMS-12-BM (katalógové číslo Cytion 300287)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Prejav a náchylnosť

Povrchové antigény
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutčný profil
Translokácia: t(11;14)(q13;q32)
Produkty
Žiadna produkcia imunoglobulínov

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Hustota výsevu
5 x 105 buniek/ml
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
64 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský