Siirry sisältöön
KMS-12-BM
Kudos
Luuydin
Sairaus
Multippeli myelooma
Synonyymit
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Asiakirjat

KMS-12-BM

Cell line · Tuotenumero 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KMS-12-BM-solulinja on ihmisen myeloomasolulinja, joka on saatu sellaisen potilaan luuytimestä, jolla ei ole tuottavaa multippelia myeloomaa. Tämä solulinja edustaa B-solujen erilaistumisen epäkypsää plasmasytoidivaihetta, jolle on ominaista pintamerkkiaineiden CD20, CD38 ja PCA-1 ilmentyminen, mutta immunoglobuliinituotannon puuttuminen. Solut ovat huomattavan vääristyneen morfologiansa vuoksi, ja monilla niistä on monitumaisia ja jättiläismäisiä piirteitä. Ultrastruktuurisesti KMS-12-BM-soluilla on hyvin kehittynyt karkea endoplasminen verkkokalvo ja soikeat eksentriset ytimet, joissa on perifeerinen kromatiinijakauma, mikä on tyypillistä plasmasytoidisille soluille.

KMS-12-BM-soluissa on kromosomipoikkeavuus, erityisesti vastavuoroinen translokaatio t(11;14)(q13;q32), joka liittyy usein multippeliin myeloomaan. Näillä soluilla on myös laaja kromosomilukujen vaihteluväli hypodiploidista polyploidiin, mikä viittaa merkittävään genomiseen epävakauteen. Toisin kuin vastineensa KMS-12-PE, KMS-12-BM-linja ei tuota amylaasia, eikä sillä ole immunoglobuliinin eritystä tai pintaekspressiota, joten se soveltuu tutkimuksiin, joissa tutkitaan immunoglobuliinia tuottamatonta myeloomaa. Lisäksi sen kloonaustehokkuus on alhainen pehmeässä agar-viljelyolosuhteissa, alle 0,1 prosenttia pesäkkeitä muodostuu, eikä sillä ole kasvaimia aiheuttavia ominaisuuksia, kun se ruiskutetaan alastomiin hiiriin.

Kudos
Luuydin
Sairaus
Multippeli myelooma
Synonyymit
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät kennot
Solutyyppi
B-solu
Kasvaimia aiheuttava
Ei aiheuta kasvaimia alastomilla hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
KMS-12-BM (Cytionin luettelonumero 300287)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Ilmentyminen ja alttius

Pinta-antigeenit
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutaatioprofiili
Translokaatio: t(11;14)(q13;q32)
Tuotteet
Ei immunoglobuliinin tuotantoa

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
Kylvötiheys
5 x 105 solua/ml
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
64 vuotta
Etnisyys
Japanilainen