Mine otse sisu juurde
KMS-12-BM
Kude
Luuüdi
Haigus
Müeloomi paljunemine
Sünonüümid
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumendid

KMS-12-BM

Cell line · Toote number 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KMS-12-BM rakuliin on inimese müeloomi rakuliin, mis on loodud mitteproduktiivse hulgimüeloomiga patsiendi luuüdist. See rakuliin esindab B-rakkude diferentseerumise ebaküpset plasmatoidset staadiumi, mida iseloomustab pinnamarkerite CD20, CD38 ja PCA-1 ekspressioon, kuid immuunglobuliini tootmise puudumine. Rakkude morfoloogiat iseloomustab nende moonutatud morfoloogia, kusjuures paljudel neist on mitmetuumalised ja hiiglaslikud tunnused. Ultrastruktuurselt on KMS-12-BM rakkudel hästi arenenud karge endoplasmaatiline retikulum ja ovoidsed ekstsentrilised tuumad perifeerse kromatiini jaotusega, mis on iseloomulikud plasmatsütoidsetele rakkudele.

KMS-12-BM rakkudel on kromosoomianomaalia, eelkõige vastastikune translokatsioon t(11;14)(q13;q32), mis on sageli seotud hulgimüeloomiga. Nendel rakkudel on ka lai kromosoomide arvude vahemik, alates hüpodiploidsetest kuni polüploidseteni, mis viitab märkimisväärsele genoomilisele ebastabiilsusele. Erinevalt oma vaste KMS-12-PE'st ei tooda KMS-12-BM liin amülaasi ja sellel puudub immunoglobuliini sekretsioon või pinnaekspressioon, mistõttu sobib see immunoglobuliini mitteprodutseeriva müeloomiga seotud uuringuteks. Lisaks sellele on selle kloonimise tõhusus pehme agar-kultuuri tingimustes madal, moodustades vähem kui 0,1% kolooniaid, ning sellel ei ole tuumorigeenseid omadusi, kui seda süstitakse alasti hiirtele.

Kude
Luuüdi
Haigus
Müeloomi paljunemine
Sünonüümid
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
B-raku
Tuumorigeenne
Ei ole tuumorigeenne alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
KMS-12-BM (Cytioni katalooginumber 300287)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pinnaantigeenid
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutatsiooniprofiil
Translokatsioon: t(11;14)(q13;q32)
Tooted
Immuunglobuliini tootmine puudub

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
5 x 105 rakku/ml
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
64 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani