Tartalomra ugrás
KMS-12-BM
Szövet
Csontvelő
Betegség
Myeloma multiplex
Szinonimák
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumentumok

KMS-12-BM

Cell line · Termékszám 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A KMS-12-BM sejtvonal egy nem termelő myeloma multiplexben szenvedő beteg csontvelőjéből létrehozott humán myeloma sejtvonal. Ez a sejtvonal a B-sejtek differenciálódásának éretlen plazmacitoid stádiumát képviseli, amelyet a CD20, CD38 és PCA-1 felszíni markerek kifejeződése, de az immunglobulin-termelés hiánya jellemez. A sejtek torz morfológiájukkal tűnnek ki, sokuk multinukleáris és óriás jellegzetességeket mutat. Ultraszerkezetileg a KMS-12-BM sejtek jól fejlett durva endoplazmatikus retikulummal és a plazmacitoid sejtekre jellemző, perifériás kromatineloszlású, tojásdad excentrikus sejtmagokkal rendelkeznek.

A KMS-12-BM sejtek kromoszóma-rendellenességet mutatnak, különösen a t(11;14)(q13;q32) reciprok transzlokációt, amely gyakran társul a myeloma multiplexhez. Ezek a sejtek a kromoszómaszámok széles skáláját mutatják, a hipodiploidtól a poliploidig, ami jelentős genomiális instabilitásra utal. A KMS-12-BM vonal - ellentétben a KMS-12-PE-vel - nem termel amilázt, és hiányzik belőle az immunglobulin szekréció vagy felszíni expresszió, így alkalmas az immunglobulin-termelő myelómával kapcsolatos vizsgálatokra. Ezen kívül alacsony klónozási hatékonyságot mutat lágy agar tenyésztési körülmények között, kevesebb mint 0,1%-os kolóniaképződéssel, és nem rendelkezik tumorigén tulajdonságokkal, amikor meztelen egerekbe injektálják.

Szövet
Csontvelő
Betegség
Myeloma multiplex
Szinonimák
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Kerek cellák
Sejttípus
B sejt
Daganatképző
Nem tumorogén meztelen egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
KMS-12-BM (Cytion katalógusszám 300287)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Kifejeződés és fogékonyság

Felszíni antigének
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutációs profil
Transzlokáció: t(11;14)(q13;q32)
Termékek
Nincs immunglobulin-termelés

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Átültetés
A tenyészeteket a táptalaj rendszeres hozzáadásával vagy cseréjével tartsa fenn. A tenyészeteket 5 x 105 sejt/ml sűrűséggel indítsa el, és az optimális növekedés érdekében tartsa a sejtkoncentrációt 3 x 105 és 1 x 106 sejt/ml közötti tartományban.
Ültetési sűrűség
5 x 105 sejt/ml
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
64 év
Etnikai hovatartozás
Japán