Pāriet uz saturu
KMS-12-BM
Audums
Kaulu smadzenes
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumenti

KMS-12-BM

Cell line · Preces numurs 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KMS-12-BM šūnu līnija ir cilvēka mielomas šūnu līnija, kas iegūta no pacienta ar multiplo mielomu, kas nerodas, kaulu smadzenēm. Šī šūnu līnija pārstāv nenobriedušu plazmacitoīdu B šūnu diferenciācijas stadiju, ko raksturo virsmas marķieru CD20, CD38 un PCA-1 ekspresija, bet nav imūnglobulīnu produkcijas. Šīm šūnām raksturīga izkropļota morfoloģija, un daudzām no tām ir multinukleāras un gigantiskas īpašības. Ultrastrukturāli KMS-12-BM šūnām ir labi attīstīts raupjais endoplazmas tīkls un olveida ekscentriski kodoli ar perifēru hromatīna izvietojumu, kas raksturīgs plazmacitoīdām šūnām.

KMS-12-BM šūnām ir hromosomu anomālija, jo īpaši abpusēja translokācija t(11;14)(q13;q32), kas bieži ir saistīta ar multiplo mielomu. Šīm šūnām ir arī plašs hromosomu skaita diapazons - no hipodiploīdām līdz poliploīdām, kas norāda uz ievērojamu genoma nestabilitāti. Atšķirībā no tās kolēģes KMS-12-PE KMS-12-BM līnija neražo amilāzi, un tai nav imūnglobulīnu sekrēcijas vai virsmas ekspresijas, tāpēc tā ir piemērota pētījumiem ar mielomu, kas neražo imūnglobulīnus. Turklāt tai ir zema klonēšanas efektivitāte mīkstā agara kultūras apstākļos, veidojot mazāk nekā 0,1 % koloniju, un tai nav audzēju izraisošo īpašību, injicējot to nude pelēm.

Audums
Kaulu smadzenes
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas
Šūnu tips
B šūna
Tumorogēns
Nav tumorogēnisks nude pelēm

04Identifikatori

Atsauce
KMS-12-BM (Cytion kataloga numurs 300287)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Pazīmes un uzņēmība

Virsmas antigēni
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutāciju profils
Translokācija: t(11;14)(q13;q32)
Produkti
Nav imūnglobulīnu ražošanas

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
5 x 105 šūnas/ml
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
64 gadi
Etniskā piederība
Japāņu