الانتقال إلى المحتوى
KMS-12-BM
الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
الورم النخاعي المتعدد
المرادفات
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

المستندات

KMS-12-BM

Cell line · رقم المنتج 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط الخلايا KMS-12-BM هو خط خلايا الورم النقوي البشري الذي تم إنشاؤه من نخاع عظم مريض مصاب بالورم النقوي المتعدد غير المنتج. ويمثل هذا الخط الخلوي مرحلة بلازمية غير ناضجة من التمايز بين الخلايا البائية، وتتميز بالتعبير عن العلامات السطحية CD20 وCD38 وPCA-1، ولكن مع نقص في إنتاج الغلوبولين المناعي. وتتميز هذه الخلايا بخصائص مورفولوجية مشوهة، حيث يظهر العديد منها خصائص متعددة النوى وعملاقة. ومن ناحية البنية فوق الهيكلية، تمتلك خلايا KMS-12-BM شبكة إندوبلازمية خشنة متطورة ونوى بيضاوية الشكل غير مركزية مع توزيع كروماتيني محيطي، وهي نموذجية للخلايا البلازمية.

تُظهر خلايا KMS-12-BM شذوذًا كروموسوميًا، خاصةً الانتقال المتبادل t(11;14)(q13;q32)، والذي غالبًا ما يرتبط بالورم النقوي المتعدد. تُظهر هذه الخلايا أيضاً نطاقاً واسعاً من الأعداد الكروموسومية، من ناقص الصبغيات إلى متعدد الصبغيات، مما يشير إلى عدم استقرار جينومي كبير. وخلافاً لنظيره KMS-12-PE، لا ينتج خط KMS-12-BM إنزيم الأميليز، ويفتقر إلى إفراز الغلوبولين المناعي أو التعبير السطحي، مما يجعله مناسباً للدراسات التي تتضمن الورم النقوي غير المنتج للغلوبولين المناعي. بالإضافة إلى ذلك، فإنه يُظهر كفاءة استنساخ منخفضة في ظروف الاستنبات بالأجار اللين، مع تكوين أقل من 0.1% من المستعمرات، وليس له خصائص مولدة للأورام عند حقنه في الفئران العارية.

الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
الورم النخاعي المتعدد
المرادفات
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا الدائرية
نوع الخلية
الخلية ب
مُسبِّب للأورام
غير مولدة للأورام في الفئران العارية

04المعرّفات

المرجع
KMS-12-BM (كتالوج سيتيون رقم 300287)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1334

05التعبير والقابلية للإصابة

المستضدات السطحية
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, CD79a +, CD80 -, CD138 +, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cyylambda -
الأنماط الطفريّة
الانتقال: t(11;14)(q13;q32)(t(11;14)(q13;q32)
المنتجات
عدم إنتاج الغلوبولين المناعي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
حافظ على الثقافات عن طريق إضافة أو استبدال الوسط بشكل دوري. ابدأ الثقافات بكثافة 5 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا في نطاق 3 × 105 إلى 1 × 106 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل.
كثافة البذر
5 × 105 خلية/مل
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
64 سنة
الأصل العرقي
ياباني