Gå til innholdet
KMS-12-BM
Vev
Benmarg
Sykdom
Multippelt myelom
Synonymer
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumenter

KMS-12-BM

Cell line · Produktnummer 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KMS-12-BM-cellelinjen er en human myelomcellelinje som er etablert fra benmargen til en pasient med ikke-produserende myelomatose. Denne cellelinjen representerer et umodent plasmacytoid stadium av B-celledifferensiering, karakterisert ved uttrykk av overflatemarkørene CD20, CD38 og PCA-1, men manglende produksjon av immunglobuliner. Cellene har en forvrengt morfologi, og mange av dem har multinukleære og gigantiske karakteristika. Ultrastrukturelt har KMS-12-BM-celler et velutviklet grovt endoplasmatisk retikulum og ovoide eksentriske kjerner med perifer kromatinfordeling, typisk for plasmacytoide celler.

KMS-12-BM-celler har en kromosomavvik, spesielt en reciprok translokasjon t(11;14)(q13;q32), som ofte er assosiert med myelomatose. Disse cellene viser også et bredt spekter av kromosomnumre, fra hypodiploide til polyploide, noe som indikerer betydelig genomisk ustabilitet. I motsetning til sin motpart KMS-12-PE produserer ikke KMS-12-BM-linjen amylase, og den mangler immunglobulinsekresjon eller overflateuttrykk, noe som gjør den egnet for studier som involverer myelom som ikke produserer immunglobulin. I tillegg viser den lav kloningseffektivitet under dyrkingsforhold i myk agar, med mindre enn 0,1 % kolonidannelse, og den har ingen tumorigeniske egenskaper når den injiseres i nakne mus.

Vev
Benmarg
Sykdom
Multippelt myelom
Synonymer
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runde celler
Celletype
B-celle
Tumorinduserende
Ikke tumorframkallende i nakne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KMS-12-BM (Cytion-katalognummer 300287)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Uttrykk og mottakelighet

Overflateantigener
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutasjonsprofil
Translokasjon: t(11;14)(q13;q32)
Produkter
Ingen immunglobulinproduksjon

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Såtetthet
5 x 105 celler/ml
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
64 år
Etnisitet
Japansk