Gå direkte til indholdet
KMS-12-BM
Væv
Knoglemarv
Sygdom
Myelomatose
Synonymer
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumenter

KMS-12-BM

Cell line · Varenummer 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KMS-12-BM-cellelinjen er en human myelomcellelinje, der er etableret fra knoglemarven hos en patient med ikke-producerende multipelt myelom. Denne cellelinje repræsenterer et umodent plasmacytoidt stadie af B-celledifferentiering, karakteriseret ved ekspression af overflademarkørerne CD20, CD38 og PCA-1, men mangel på immunglobulinproduktion. Cellerne er bemærkelsesværdige for deres forvrængede morfologi, hvor mange viser multinukleare og gigantiske karakteristika. Ultrastrukturelt har KMS-12-BM-celler et veludviklet groft endoplasmatisk retikulum og ægformede excentriske kerner med perifer kromatinfordeling, som er typisk for plasmacytoide celler.

KMS-12-BM-celler udviser en kromosomafvigelse, især en reciprok translokation t(11;14)(q13;q32), som ofte er forbundet med multipelt myelom. Disse celler viser også en bred vifte af kromosomtal, fra hypodiploid til polyploid, hvilket indikerer betydelig genomisk ustabilitet. I modsætning til sin modpart KMS-12-PE producerer KMS-12-BM-linjen ikke amylase, og den mangler immunoglobulinsekretion eller overfladeekspression, hvilket gør den velegnet til undersøgelser, der involverer myelom, der ikke producerer immunoglobulin. Derudover viser den lav kloningseffektivitet under bløde agarkulturforhold med mindre end 0,1 % kolonidannelse, og den har ingen tumorigeniske egenskaber, når den injiceres i nøgne mus.

Væv
Knoglemarv
Sygdom
Myelomatose
Synonymer
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Runde celler
Celletype
B-celle
Tumorfremkaldende
Ikke svulstfremkaldende i nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KMS-12-BM (Cytion katalognummer 300287)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Udtryk og modtagelighed

Overfladeantigener
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutationsprofil
Translokation: t(11;14)(q13;q32)
Produkter
Ingen produktion af immunglobulin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Vedligehold kulturerne ved regelmæssigt at tilføje eller udskifte mediet. Start kulturerne med en tæthed på 5 x 105 celler/ml og hold cellekoncentrationen inden for området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vækst.
Såtæthed
5 x 105 celler/ml
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
64 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk