Премини към съдържанието
KMS-12-BM
Тъкан
Костен мозък
Заболяване
Множествен миелом
Синоними
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Документи

KMS-12-BM

Cell line · Номер на продукта 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия KMS-12-BM е човешка миеломна клетъчна линия, създадена от костния мозък на пациент с непродуциращ множествен миелом. Тази клетъчна линия представлява незрял плазмоцитоиден стадий на В-клетъчна диференциация, характеризиращ се с експресия на повърхностни маркери CD20, CD38 и PCA-1, но с липса на производство на имуноглобулини. Клетките се отличават с изкривена морфология, като много от тях имат многоядрени и гигантски характеристики. В ултраструктурно отношение клетките KMS-12-BM притежават добре развит груб ендоплазмен ретикулум и яйцевидни ексцентрични ядра с периферно разпределение на хроматина, типично за плазмоцитоидните клетки.

Клетките KMS-12-BM показват хромозомна аномалия, по-специално реципрочна транслокация t(11;14)(q13;q32), която често се свързва с множествен миелом. Тези клетки също така показват широк диапазон от хромозомни числа, от хиподиплоидни до полиплоидни, което показва значителна геномна нестабилност. За разлика от своя аналог KMS-12-PE, линията KMS-12-BM не произвежда амилаза и няма секреция на имуноглобулин или повърхностна експресия, което я прави подходяща за изследвания, включващи миелом, който не произвежда имуноглобулин. Освен това тя показва ниска ефективност на клониране в условия на култивиране в мек агар, с образуване на по-малко от 0,1 % колонии, и няма туморогенни свойства при инжектиране в голи мишки.

Тъкан
Костен мозък
Заболяване
Множествен миелом
Синоними
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Кръгли клетки
Тип клетка
Клетка B
Туморогенен
Не е туморогенен при голи мишки

04Идентификатори

Източник
KMS-12-BM (каталожен номер 300287 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1334

05Проява и предразположеност

Повърхностни антигени
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Мутационен профил
Транслокация: t(11;14)(q13;q32)
Продукти
Няма производство на имуноглобулин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Пресаждане
Поддържайте културите, като периодично добавяте или подменяте средата. Започнете културите с плътност 5 x 105 клетки/ml и поддържайте концентрацията на клетките в диапазона от 3 x 105 до 1 x 106 клетки/ml за оптимален растеж.
Плътност на засяването
5 x 105 клетки/ml
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
64 години
Етническа принадлежност
Японски