KMS-12-BM

La linea cellulare KMS-12-BM è una linea cellulare di mieloma umano ottenuta dal midollo osseo di un paziente con mieloma multiplo non produttivo. Questa linea cellulare rappresenta uno stadio plasmacitoide immaturo della differenziazione delle cellule B, caratterizzato dall'espressione dei marcatori di superficie CD20, CD38 e PCA-1, ma dalla mancanza di produzione di immunoglobuline. Le cellule si distinguono per la loro morfologia distorta, con molte che mostrano caratteristiche multinucleari e giganti. Dal punto di vista ultrastrutturale, le cellule KMS-12-BM possiedono un reticolo endoplasmatico ruvido ben sviluppato e nuclei ovoidali eccentrici con distribuzione periferica della cromatina, tipica delle cellule plasmacitoidi.

Le cellule KMS-12-BM presentano un'anomalia cromosomica, in particolare una traslocazione reciproca t(11;14)(q13;q32), spesso associata al mieloma multiplo. Queste cellule mostrano anche un'ampia gamma di numeri cromosomici, da ipodiploidi a poliploidi, indicando una significativa instabilità genomica. A differenza della sua controparte KMS-12-PE, la linea KMS-12-BM non produce amilasi e manca della secrezione di immunoglobuline o dell'espressione di superficie, il che la rende adatta agli studi sul mieloma che non produce immunoglobuline. Inoltre, mostra una bassa efficienza di clonazione in condizioni di coltura in soft agar, con una formazione di colonie inferiore allo 0,1%, e non ha proprietà tumorigeniche quando viene iniettata in topi nudi.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia