Přejít na obsah
KMS-12-BM
Tkáň
Kostní dřeň
Nemoc
Mnohočetný myelom
Synonyma
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumenty

KMS-12-BM

Cell line · Číslo výrobku 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie KMS-12-BM je lidská myelomová buněčná linie vytvořená z kostní dřeně pacienta s neprodukujícím mnohočetným myelomem. Tato buněčná linie představuje nezralé plazmocytoidní stadium diferenciace B-buněk, které je charakterizováno expresí povrchových markerů CD20, CD38 a PCA-1, ale chybí produkce imunoglobulinů. Buňky se vyznačují deformovanou morfologií, přičemž mnohé z nich vykazují vícejaderné a obrovské znaky. Ultrastrukturálně mají buňky KMS-12-BM dobře vyvinuté drsné endoplazmatické retikulum a vejčitá excentrická jádra s periferním rozložením chromatinu, typickým pro plazmocytoidní buňky.

Buňky KMS-12-BM vykazují chromozomální abnormality, zejména reciprokou translokaci t(11;14)(q13;q32), která je často spojována s mnohočetným myelomem. Tyto buňky také vykazují širokou škálu chromozomálních čísel, od hypodiploidních až po polyploidní, což svědčí o významné genomické nestabilitě. Na rozdíl od svého protějšku KMS-12-PE linie KMS-12-BM neprodukuje amylázu a postrádá sekreci imunoglobulinů nebo jejich povrchovou expresi, takže je vhodná pro studie zahrnující myelom neprodukující imunoglobuliny. Kromě toho vykazuje nízkou účinnost klonování v podmínkách kultivace na měkkém agaru s tvorbou méně než 0,1 % kolonií a při injekčním podání nahým myším nemá žádné tumorigenní vlastnosti.

Tkáň
Kostní dřeň
Nemoc
Mnohočetný myelom
Synonyma
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté buňky
Typ buňky
B buňka
Tumorogenní
Není tumorigenní u nahých myší

04Identifikátory

Citace
KMS-12-BM (katalogové číslo Cytion 300287)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Exprese a náchylnost

Povrchové antigeny
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutační profil
Translokace: t(11;14)(q13;q32)
Produkty
Žádná produkce imunoglobulinů

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Kultury udržujte pravidelným přidáváním nebo výměnou média. Zahajte kultury s hustotou 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk v rozmezí 3 x 105 až 1 x 106 buněk/ml.
Hustota výsevu
5 x 105 buněk/ml
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
64 let
Etnická příslušnost
Japonský