İçeriğe atla
KMS-12-BM
Doku
Kemik iliği
Hastalık
Multipl Miyelom
Eş anlamlılar
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

KMS-12-BM

Cell line · Ürün numarası 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KMS-12-BM hücre hattı, multipl miyelom üretmeyen bir hastanın kemik iliğinden elde edilen bir insan miyelom hücre hattıdır. Bu hücre dizisi, yüzey belirteçleri CD20, CD38 ve PCA-1'in ekspresyonu ile karakterize edilen, ancak immünoglobulin üretiminin olmadığı, B-hücresi farklılaşmasının olgunlaşmamış bir plazmasitoid aşamasını temsil eder. Hücreler çarpık morfolojileriyle dikkat çekmektedir ve birçoğu multinükleer ve dev özellikler göstermektedir. Ultrastrüktürel olarak, KMS-12-BM hücreleri iyi gelişmiş kaba endoplazmik retikulum ve plazmasitoid hücreler için tipik olan periferal kromatin dağılımına sahip oval eksantrik çekirdeklere sahiptir.

KMS-12-BM hücreleri kromozomal bir anormallik, özellikle de sıklıkla multipl miyelom ile ilişkilendirilen resiprokal translokasyon t(11;14)(q13;q32) sergiler. Bu hücreler ayrıca hipodiploidden poliploide kadar geniş bir kromozomal sayı yelpazesi sergileyerek önemli genomik kararsızlığa işaret etmektedir. Muadili KMS-12-PE'nin aksine, KMS-12-BM hattı amilaz üretmez ve immünoglobulin salgılaması veya yüzey ekspresyonu yoktur, bu da onu immünoglobulin üretmeyen miyelomu içeren çalışmalar için uygun hale getirir. Ayrıca, yumuşak agar kültür koşullarında %0,1'den daha az koloni oluşumuyla düşük klonlama verimliliği gösterir ve çıplak farelere enjekte edildiğinde tümörijenik özelliklere sahip değildir.

Doku
Kemik iliği
Hastalık
Multipl Miyelom
Eş anlamlılar
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Yuvarlak hücreler
Hücre türü
B hücresi
Tümör oluşturucu
Çıplak farelerde tümörijenik değildir

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KMS-12-BM (Cytion katalog numarası 300287)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05İfade ve duyarlılık

Yüzey antijenleri
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Mutasyon profili
Translokasyon: t(11;14)(q13;q32)
Ürünler
İmmünoglobulin üretimi yok

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Kültürleri, besiyerini periyodik olarak ekleyerek veya değiştirerek muhafaza edin. Kültürleri 5 x 105 hücre/ml yoğunlukta başlatın ve optimal büyüme için hücre konsantrasyonunu 3 x 105 ila 1 x 106 hücre/ml aralığında tutun.
Ekim yoğunluğu
5 x 105 hücre/ml
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
64 yıl
Etnik köken
Japonca