Preskoči na vsebino
KMS-12-BM
Tkivo
Kostni mozeg
Bolezen
Multipli mielom
Sinonimi
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Dokumenti

KMS-12-BM

Cell line · Številka izdelka 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KMS-12-BM je človeška mielomska celična linija, pridobljena iz kostnega mozga bolnika z multiplim mielomom, ki se ni razvil. Ta celična linija predstavlja nezrelo plazmacitoidno stopnjo diferenciacije celic B, za katero je značilno izražanje površinskih označevalcev CD20, CD38 in PCA-1, vendar ne proizvaja imunoglobulinov. Celice se odlikujejo po izkrivljeni morfologiji, pri čemer imajo mnoge večjedrne in orjaške značilnosti. Ultrastrukturno imajo celice KMS-12-BM dobro razvit grob endoplazemski retikulum in jajčasta ekscentrična jedra s periferno porazdelitvijo kromatina, kar je značilno za plazmacitoidne celice.

Celice KMS-12-BM imajo kromosomsko nepravilnost, zlasti recipročno translokacijo t(11;14)(q13;q32), ki je pogosto povezana z multiplimi mielomi. Te celice kažejo tudi širok razpon števila kromosomov, od hipodiploidnih do poliploidnih, kar kaže na znatno genomsko nestabilnost. Za razliko od svojega kolega KMS-12-PE linija KMS-12-BM ne proizvaja amilaze in nima izločanja ali površinskega izražanja imunoglobulinov, zato je primerna za študije, ki vključujejo mielom, ki ne proizvaja imunoglobulinov. Poleg tega kaže nizko učinkovitost kloniranja v pogojih gojenja na mehkem agarju z manj kot 0,1 % tvorbe kolonij in nima tumorigenih lastnosti pri injiciranju v gole miši.

Tkivo
Kostni mozeg
Bolezen
Multipli mielom
Sinonimi
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Vrsta celice
Celica B
Tumorigeničen
Ni tumorigen pri golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
KMS-12-BM (kataloška številka Cytion 300287)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Izražanje in dovzetnost

Površinski antigeni
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Profil mutacij
Translokacija: t(11;14)(q13;q32)
Izdelki
Ni proizvodnje imunoglobulinov

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 5 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 3 x 105 do 1 x 106 celic/ml.
Gostota setve
5 x 105 celic/ml
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
64 let
Etnična pripadnost
Japonski