KMS-12-BM

La línea celular KMS-12-BM es una línea celular de mieloma humano establecida a partir de la médula ósea de un paciente con mieloma múltiple no productor. Esta línea celular representa un estadio plasmocitoide inmaduro de diferenciación de células B, caracterizado por la expresión de los marcadores de superficie CD20, CD38 y PCA-1, pero una falta de producción de inmunoglobulinas. Las células destacan por su morfología distorsionada, y muchas muestran características multinucleares y gigantes. Desde el punto de vista ultraestructural, las células KMS-12-BM poseen un retículo endoplásmico rugoso bien desarrollado y núcleos ovoides excéntricos con distribución periférica de la cromatina, típica de las células plasmocitoides.

Las células KMS-12-BM presentan una anomalía cromosómica, en particular una translocación recíproca t(11;14)(q13;q32), que suele asociarse al mieloma múltiple. Estas células también muestran una amplia gama de números cromosómicos, desde hipodiploides a poliploides, lo que indica una inestabilidad genómica significativa. A diferencia de su homóloga KMS-12-PE, la línea KMS-12-BM no produce amilasa, y carece de secreción de inmunoglobulinas o de expresión de superficie, lo que la hace adecuada para estudios sobre mieloma no productor de inmunoglobulinas. Además, muestra una baja eficiencia de clonación en condiciones de cultivo en agar blando, con menos del 0,1% de formación de colonias, y no tiene propiedades tumorigénicas cuando se inyecta en ratones desnudos.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía