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KMS-12-BM
Tecido
Medula óssea
Doença
Mieloma múltiplo
Sinónimos
KMS 12 BM, KMS-12BM, KMS12-BM, KMS12BM, KMS-12, KMS12, Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

Documentos

KMS-12-BM

Cell line · Número do produto 300287

The KMS-12-BM cell line is a human myeloma cell line established from the bone marrow of a patient with non-producing multiple myeloma. This cell line rep...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular KMS-12-BM é uma linha celular de mieloma humano estabelecida a partir da medula óssea de um doente com mieloma múltiplo não produtor. Esta linha celular representa uma fase plasmocitóide imatura da diferenciação das células B, caracterizada pela expressão dos marcadores de superfície CD20, CD38 e PCA-1, mas pela ausência de produção de imunoglobulinas. As células são notáveis pela sua morfologia distorcida, com muitas apresentando caraterísticas multinucleares e gigantes. Ultra-estruturalmente, as células KMS-12-BM possuem retículo endoplasmático rugoso bem desenvolvido e núcleos excêntricos ovóides com distribuição periférica da cromatina, típica das células plasmocitóides.

As células KMS-12-BM apresentam uma anomalia cromossómica, particularmente uma translocação recíproca t(11;14)(q13;q32), que está frequentemente associada ao mieloma múltiplo. Estas células também apresentam uma vasta gama de números cromossómicos, desde hipodiplóides a poliplóides, o que indica uma instabilidade genómica significativa. Ao contrário da sua congénere KMS-12-PE, a linha KMS-12-BM não produz amilase e não possui secreção de imunoglobulina ou expressão de superfície, o que a torna adequada para estudos que envolvam mieloma não produtor de imunoglobulina. Além disso, apresenta uma baixa eficiência de clonagem em condições de cultura em ágar mole, com menos de 0,1% de formação de colónias, e não tem propriedades tumorigénicas quando injectada em ratinhos nus.

Tecido
Medula óssea
Doença
Mieloma múltiplo
Sinónimos
  • KMS 12 BM
  • KMS-12BM
  • KMS12-BM
  • KMS12BM
  • KMS-12
  • KMS12
  • Kawasaki Medical School-12-Bone Marrow

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células redondas
Tipo de célula
Célula B
Tumorigénico
Não tumorigénico em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
KMS-12-BM (número de catálogo Cytion 300287)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1334

05Expressão e suscetibilidade

Antigénios de superfície
CD3 -, CD10 -, CD13 -, CD19 -, CD20 +, CD34 -, CD37 +, CD38 +, cyCD79a +, CD80 -, CD138 +, HLA-DR -, PCA-1 +, sm/cyIgG -, sm/cyIgM -, sm/cykappa -, sm/cylambda -
Perfil mutacional
Translocação: t(11;14)(q13;q32)
Produtos
Sem produção de imunoglobulinas

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Mantenha as culturas adicionando ou substituindo periodicamente o meio. Inicie as culturas com uma densidade de 5 x 105 células/ml e mantenha a concentração celular dentro da faixa de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para um crescimento ideal.
Densidade de sementeira
5 x 105 células/ml
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
64 anos
Etnia
Japonês