สื่อและสารตั้งต้น

40 products

Sort

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

excl. tax and shipping

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

€310.00

excl. tax and shipping

Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Advanced Endothelial Cell Growth Medium

Advanced Endothelial Cell Growth Medium is used for the culture of human endothelial cells from large vessels. Defined human recombinant growth factors, including VEGF and Long R3 IGF-1, replace the crude endothelial cell growth supplement. The complete medium contains foetal calf serum, L-glutamine, heparin, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, ascorbic acid and hydrocortisone. For faster expansion with a higher serum content, choose Endothelial Cell Proliferation Medium. For a formulation without VEGF, choose Endothelial Cell Growth Medium. We offer the medium as 500 ml basal medium, on its own or together with the supplements, either as individual components or as a premixed Supplement-Mix. The individual components allow single factors to be adjusted or left out, while the Supplement-Mix is added in a single step. The basal medium is also available phenol red-free in the same formats, which avoids interference with fluorescence and colorimetric readouts as well as the weak oestrogen-like activity of phenol red. Supplements are required for use, and both supplement formats are also available separately. Once supplemented, the complete medium contains 2 % FCS (10 ml per 500 ml of basal medium).

€180.00

excl. tax and shipping

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium

Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium is used for the culture of human microvascular endothelial cells, for example from dermis, lung or heart. Defined human recombinant growth factors replace the crude endothelial cell growth supplement. The complete medium contains foetal calf serum, L-glutamine, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, ascorbic acid and hydrocortisone. For a formulation with ECGS/H and without VEGF, choose Microvascular Endothelial Cell Growth Medium. We offer the medium as 500 ml basal medium, on its own or together with the supplements, either as individual components or as a premixed Supplement-Mix. The individual components allow single factors to be adjusted or left out, while the Supplement-Mix is added in a single step. The basal medium is also available phenol red-free in the same formats, which avoids interference with fluorescence and colorimetric readouts as well as the weak oestrogen-like activity of phenol red. Supplements are required for use, and both supplement formats are also available separately. Once supplemented, the complete medium contains 5 % FCS (25 ml per 500 ml of basal medium).

€200.00

excl. tax and shipping

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

excl. tax and shipping

Chondrocyte Growth Medium

Chondrocyte Growth Medium is used for the monolayer expansion of human and bovine chondrocytes, for example before transfer into pellet or scaffold culture. We offer the medium as 500 ml basal medium, on its own or together with the supplements, either as individual components or as a premixed Supplement-Mix. The individual components allow single factors to be adjusted or left out, while the Supplement-Mix is added in a single step. The basal medium is also available phenol red-free in the same formats, which avoids interference with fluorescence and colorimetric readouts as well as the weak oestrogen-like activity of phenol red. Supplements are required for use, and both supplement formats are also available separately. Once supplemented, the complete medium contains 10 % FCS (50 ml per 500 ml of basal medium).

€310.00

excl. tax and shipping

Cytion Defined fibroblast growth medium-maintenance, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850143

Defined Fibroblast Maintenance Medium

Defined Fibroblast Maintenance Medium is a serum-free, fully defined medium that keeps human fibroblasts in a stable state rather than driving rapid expansion. It suits secretome, extracellular matrix and compound testing work where serum would interfere. The complete medium contains L-glutamine, human recombinant bFGF and human recombinant insulin. For the expansion of fibroblasts, choose Fibroblast Growth Medium. We offer the medium as 500 ml basal medium, on its own or together with the serum-free supplements, either as individual components or as a premixed Supplement-Mix. The individual components allow single factors to be adjusted or left out, while the Supplement-Mix is added in a single step. Supplements are required for use, and both supplement formats are also available separately.

€170.00

excl. tax and shipping

D-Glucose Solution (Dextrose Solution), 250 g/L

Volume: 50 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered D-(+)-Glucose Solution (Dextrose Solution) is a sterile, ready-to-use supplement containing the naturally occurring sugar D-(+)-glucose, a central component of cellular metabolism. Glucose is involved in essential biological processes such as energy production, glycosylation, and the formation of glycans that contribute to cellular structure and function. Application and Benefits This glucose solution is widely used as a supplement in cell culture media and in numerous cellular and molecular biology applications. As a primary carbon and energy source, glucose supports cell growth, proliferation, and metabolic activity. Its involvement in biosynthetic pathways also makes it critical for maintaining normal cellular physiology and experimental consistency. Formulation and Usage The solution is supplied at a high concentration of 250 g/L glucose, allowing flexible dilution into culture media according to experimental requirements. It is sterile-filtered to ensure suitability for contamination-sensitive applications. Store at +2°C to +8°C and handle aseptically to maintain product quality and stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€32.00

excl. tax and shipping

DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glucose, w: 2.5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodium pyruvate, w: 1.2 g/L NaHCO3

DMEM:Ham's F12 is a widely recognized and extensively utilized basal medium in cell culture for biological research. It serves as a fundamental source of nutrients for the growth of various mammalian cell lines, particularly when supplemented with Fetal Bovine Serum (FBS). This unique formulation combines Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) and Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in a precise 1:1 ratio. The addition of L-glutamine further enhances its composition. DMEM, derived from Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), offers an increased concentration of amino acids and vitamins compared to its predecessor. In contrast, Ham's F-12 is based on Ham's F-10 medium, providing a complementary set of essential components. To support optimal cell growth, it is common practice to supplement DMEM:Ham's F12 with FBS at a typical concentration of 5-10%. This addition is necessary as the medium lacks growth hormones, lipids, and proteins crucial for cellular development. DMEM:Ham's F12 incorporates a pH buffer system and is often supplemented with phenol red, a pH indicator. Cultured cells in DMEM:Ham's F12, or any medium utilizing the bicarbonate buffer system, require a controlled CO2 environment of 5-10% to maintain appropriate pH levels. Quality Control • Sterile-filtered Storage and Shelf Life • Store at +2°C to +8°C, protected from light. • Once opened, store at 4°C and use within 6–8 weeks. Shipping Conditions • Ambient temperature Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Avoid freezing and frequent warming to +37°C, as it reduces product quality. • Do not heat the medium beyond 37°C or use uncontrolled heat sources such as microwave appliances. • If only part of the medium is to be used, remove the required amount and warm it to room temperature before use. Composition Category Components Concentration (mg/L) Amino Acids Glycine 18.75 L-Alanine 4.45 L-Arginine HCl 147.50 L-Asparagine H₂O 7.50 L-Aspartic Acid 6.65 L-Cysteine HCl H₂O 17.56 L-Cystine 2 HCl 31.29 L-Glutamic Acid 7.35 L-Glutamine 365.00 L-Histidine HCl H₂O 31.48 L-Isoleucine 54.47 L-Leucine 59.05 L-Lysine HCl 91.25 L-Methionine 17.24 L-Phenylalanine 35.48 L-Proline 17.25 L-Serine 26.25 L-Threonine 53.45 L-Tryptophan 9.02 L-Tyrosine 2 Na 2 H2O 55.79 L-Valine 52.85 Vitamins D-Biotin 0.0035 Choline Chloride 8.98 D-Calcium Pantothenate 2.24 Folic Acid 2.66 myo-Inositol 12.60 Nicotinamide 2.02 Pyridoxine HCl 0.031 Pyridoxal HCl 2.00 Riboflavin 0.219 Thiamine HCl 2.17 Vitamin B12 0.68 Inorganic Salts CaCl2 2 H2O 154.50 CuSO4 5 H2O 0.0013 Fe(NO3)3 9 H2O 0.05 FeSO4 7 H2O 0.417 KCl 311.80 MgCl2 6 H2O 61.20 MgSO4 7 H2O 100.00 NaCl 6996.00 NaHCO3 1200.00 Na2HPO4 71.02 NaH2PO4 2 H2O 70.87 ZnSO4 7 H2O 0.432 Other Components D-Glucose 3151.00 Hypoxanthine 2.40 HEPES 3574.50 Linoleic Acid 0.042 Lipoic Acid 0.105 Phenol Red Sodium Salt 8.63 Putrescine 2 HCl 0.081 Sodium Pyruvate 55.00 Thymidine 0.365

€25.00

excl. tax and shipping

DMEM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM Sodium pyruvate

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) is a highly versatile and widely utilized basal medium designed to support the growth of a diverse range of mammalian cells in biological research. It serves as an ideal medium for culturing primary fibroblasts, neurons, glial cells, HUVECs, smooth muscle cells, as well as popular cell lines like HeLa, 293, Cos-7, and PC-12. What sets DMEM apart from other media is its unique composition. It contains an impressive fourfold increase in amino acid and vitamin concentration compared to the original Eagle's Minimal Essential Medium. Initially developed with low glucose (1 g/L) and sodium pyruvate, DMEM is frequently employed with higher glucose levels, either with or without sodium pyruvate. Notably, DMEM does not contain proteins, lipids, or growth factors, necessitating supplementation. To achieve optimal growth, a common approach is to supplement DMEM with 10% Fetal Bovine Serum (FBS). Additionally, DMEM employs a sodium bicarbonate buffer system, requiring a 5-10% CO2 environment to maintain a physiological pH. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) is highly regarded among defined media for cell and tissue culture, catering to the growth needs of various adherent cell phenotypes. It surpasses the original Eagle's Medium, developed in the 1950s for cultivating chicken cells, through the enhanced supplementary formulation known as Dulbecco's modification. This modification significantly elevates the content of select amino acids and vitamins up to fourfold compared to the original medium. In the field of cell culture, DMEM plays a vital role as a growth medium for different cell types, including primary cells, stem cells, and transformed cells. Researchers also employ the modified version of DMEM for a wide array of research applications, such as drug discovery, tissue engineering, and the study of cell signaling pathways. Quality Control • Sterile-filtered Storage and Shelf Life • Store at +2°C to +8°C, protected from light. • Once opened, store at 4°C and use within 6–8 weeks. Shipping Conditions • Ambient temperature Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Avoid freezing and frequent warming to +37°C, as it reduces product quality. • Do not heat the medium beyond 37°C or use uncontrolled heat sources such as microwave appliances. • If only part of the medium is to be used, remove the required amount and warm it to room temperature before use. Composition Category Components Concentration (mg/L) Amino Acids Glycine 30.00 L-Arginine HCl 84.00 L-Cystine 2 HCl 62.57 L-Glutamine 584.00 L-Histidine HCl H2O 42.00 L-Isoleucine 105.00 L-Leucine 105.00 L-Lysine HCl 146.00 L-Methionine 30.00 L-Phenylalanine 66.00 L-Serine 42.00 L-Threonine 95.00 L-Tryptophan 16.00 L-Tyrosine 2 Na 2H2O 103.79 L-Valine 94.00 Vitamins Choline chloride 4.00 D-Calcium Pantothenate 4.00 Folic Acid 4.00 myo-Inositol 7.20 Nicotinamide 4.00 Pyridoxal HCl 4.00 Riboflavin 0.40 Thiamine HCl 4.00 Inorganic Salts CaCl2 2 H2O 265.00 Fe(NO3)3 9 H2O 0.10 KCl 400.00 MgSO4 7H2O 200.10 NaCl 6400.00 NaHCO3 3700.00 NaH2PO4 2H2O 141.73 Other Components D-Glucose 4500.00 Phenol Red Sodium Salt 15.90 Sodium Pyruvate 110.00

€25.00

excl. tax and shipping

EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS

Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) is one of the most widely used basal media for the cultivation of a broad range of mammalian cells, particularly adherent cell lines. Originally developed by Harry Eagle, this classic formulation contains the essential amino acids, vitamins, and inorganic salts required to support the growth of both primary cells and established cell lines under standard culture conditions. This ready-to-use, sterile-filtered liquid formulation is supplemented with Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamine, D-glucose (1.0 g/L), and 2.2 g/L sodium bicarbonate (NaHCO3), making it suitable for use in a CO2-controlled incubator atmosphere (typically 5 % CO2). The included phenol red acts as a pH indicator, allowing convenient visual monitoring of medium condition during cell culture. Key Features • Classic Eagle’s MEM formulation with Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS) • 2 mM L-glutamine included – ready for immediate use • 2.2 g/L sodium bicarbonate – buffered for 5 % CO2 incubation • With D-glucose (1.0 g/L) as primary carbon source • With phenol red as pH indicator • Without HEPES and without sodium pyruvate • Sterile-filtered liquid medium, ready to use • pH 7.0 – 7.6 Typical Applications EMEM supports the cultivation of a wide variety of mammalian cell lines, including HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21, and many primary cells. Common applications include: • Routine maintenance and expansion of adherent cell lines • Virus propagation and vaccine production workflows • Cytotoxicity and bioassay applications • Transfection and protein expression studies • Foundational research in cell biology and molecular biology For optimal cell growth, EMEM is typically supplemented with 5–10 % fetal bovine serum (FBS) and, depending on the cell line, with non-essential amino acids (NEAA) and antibiotics such as penicillin/streptomycin. Handling & Storage Store the unopened bottle at +2 °C to +8 °C, protected from light. After opening, use under aseptic conditions. L-Glutamine in solution is subject to gradual degradation – we recommend using the medium within 4 weeks of opening for best performance, or supplementing with fresh L-glutamine prior to use if stored for longer periods. Allow the medium to warm to 37 °C before adding it to cells. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch is tested for sterility, pH, osmolality, and endotoxin levels to ensure consistent performance in cell culture applications. Product Specifications Specification Detail Product typeMEM Product categoryCell culture media FormatLiquid SterileYes Size500 ml L-GlutamineWith L-glutamine (2 mM) GlucoseWith glucose (1.0 g/L) Sodium bicarbonateWith NaHCO3 (2.2 g/L) HEPESWithout HEPES Sodium pyruvateWithout sodium pyruvate Phenol redWith phenol red Salt solutionEarle’s Balanced Salt Solution (EBSS) pH7.0 – 7.6 Endotoxin contentNot specified Storage+2 °C to +8 °C Formulation (Composition per Liter)

€25.00

excl. tax and shipping

Endothelial Cell Growth Medium

Endothelial Cell Growth Medium is the standard medium for the culture of human endothelial cells from large vessels, such as umbilical vein, umbilical artery, saphenous vein and aorta. The complete medium contains foetal calf serum, L-glutamine, ECGS/H (endothelial cell growth supplement with heparin), EGF, bFGF and hydrocortisone. For defined recombinant growth factors including VEGF instead of ECGS/H, choose Advanced Endothelial Cell Growth Medium. We offer the medium as 500 ml basal medium, on its own or together with the supplements, either as individual components or as a premixed Supplement-Mix. The individual components allow single factors to be adjusted or left out, while the Supplement-Mix is added in a single step. The basal medium is also available phenol red-free in the same formats, which avoids interference with fluorescence and colorimetric readouts as well as the weak oestrogen-like activity of phenol red. Supplements are required for use, and both supplement formats are also available separately. Once supplemented, the complete medium contains 2 % FCS (10 ml per 500 ml of basal medium).

€200.00

excl. tax and shipping

Endothelial Cell Proliferation Medium

Endothelial Cell Proliferation Medium is designed for the fast expansion of human endothelial cells from large vessels, such as umbilical vein, umbilical artery, saphenous vein, aorta, coronary and pulmonary artery. The complete medium contains foetal calf serum, L-glutamine, heparin, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, ascorbic acid and hydrocortisone. For a lower serum content, choose Advanced Endothelial Cell Growth Medium. We offer the medium as 500 ml basal medium, on its own or together with the supplements, either as individual components or as a premixed Supplement-Mix. The individual components allow single factors to be adjusted or left out, while the Supplement-Mix is added in a single step. The basal medium is also available phenol red-free in the same formats, which avoids interference with fluorescence and colorimetric readouts as well as the weak oestrogen-like activity of phenol red. Supplements are required for use, and both supplement formats are also available separately. Once supplemented, the complete medium contains 7 % FCS (35 ml per 500 ml of basal medium).

€170.00

excl. tax and shipping

500 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS South America 500ml

Sourced from South American bovine sources, this sterile-filtered Fetal Bovine Serum (FBS) provides consistent cell culture performance. Prior to release, every batch is tested for sterility, mycoplasma, and bovine viruses. Furthermore, each lot is evaluated to verify its ability to support the growth of HEK293 and CHO cells. The serum is available in 50 mL and 500 mL volumes, and a lot-specific Certificate of Analysis (CoA) can be provided upon request.

€310.00

excl. tax and shipping

50 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS South Origin 50ml

€32.00

excl. tax and shipping

FBS US 500 ml

Sourced from the United States, this sterile-filtered Fetal Bovine Serum (FBS) provides a consistent foundation for cell culture applications. Every batch undergoes quality control screening for sterility, mycoplasma, and bovine viruses. Additionally, each lot is biologically validated to confirm its ability to support the growth of CHO and HEK293 cell lines. The serum is packaged in 50 mL and 500 mL volumes. Batch-specific Certificates of Analysis (CoA) are available upon request.

€506.00

excl. tax and shipping

500 ml bottle Fetal Bovine Serum US Origin (FBS)

FBS US Origin 50ml

€52.00

excl. tax and shipping

Fibroblast Growth Medium

Fibroblast Growth Medium is used for the culture of human fibroblasts, for example from dermis or gingiva. For serum-free maintenance under defined conditions, choose Defined Fibroblast Maintenance Medium. We offer the medium as 500 ml basal medium, on its own or together with the supplements, either as individual components or as a premixed Supplement-Mix. The individual components allow single factors to be adjusted or left out, while the Supplement-Mix is added in a single step. The basal medium is also available phenol red-free in the same formats, which avoids interference with fluorescence and colorimetric readouts as well as the weak oestrogen-like activity of phenol red. Supplements are required for use, and both supplement formats are also available separately. Once supplemented, the complete medium contains 10 % FCS (50 ml per 500 ml of basal medium).

€180.00

excl. tax and shipping

Freeze Medium CM-1 - 100 ml

Cytion’s Freeze Medium CM-1 is a state-of-the-art cryopreservation medium designed to ensure the highest level of cell viability and functionality post-thaw. This versatile medium is suitable for a broad spectrum of cell types, including both human and animal cells, making it an essential tool for diverse research applications. Formulated with a meticulously balanced combination of cryoprotectants and essential nutrients, Freeze Medium CM-1 minimizes ice crystal formation and cellular stress during the freezing process, thus preserving cellular integrity. Key features of Freeze Medium CM-1 include: • Broad Compatibility: Effective for a wide range of cell types, including primary cells, stem cells, and established cell lines. • High Viability: Optimized to maximize post-thaw cell recovery and viability, ensuring reliable experimental outcomes. • Ready-to-Use: Conveniently prepared and sterilized for immediate application, reducing preparation time and risk of contamination. • Enhanced Stability: Maintains consistent performance under standard cryopreservation conditions, ensuring reproducible results. • Long Shelf Life: CM-1 is a serum-containing, ready-to-use cryopreservation medium that can be stored in the refrigerator for up to one year. Using CM-1 for Freezing Cells To use CM-1 for freezing both adherent and suspension cells, follow these steps: • For adherent cells, wash and dissociate them from the culture substrate. For suspension cells, proceed directly to the next step. • Count the cells to ensure they are at the proper concentration. • Centrifuge the cells to pellet them, then resuspend in CM-1 freeze medium. • Transfer the resuspended cells into cryovials. • Use a slow-freezing method before transferring the cells to long-term storage. Method Description Steps ❄️ Manual Freezing A step-by-step method involving gradual temperature reduction to ensure cell viability. 1️⃣ Place cells in freeze medium in a 4°C freezer for 40 minutes. 2️⃣ Transfer to a -80°C freezer for 24 hours. 3️⃣ Store cells in liquid nitrogen for long-term preservation. ❄️ Using Mr. Frosty A convenient device that allows for controlled freezing rates without electrical power. 1️⃣ Prepare cells in cryovials with freeze medium. 2️⃣ Place cryovials in Mr. Frosty container. 3️⃣ Store at -80°C for 24 hours before transferring to liquid nitrogen. ❄️ Controlled-Rate Freezer A high-precision freezer by Thermo Fisher or other manufacturers designed for controlled temperature reduction. 1️⃣ Program the device to gradually decrease the temperature. 2️⃣ Place prepared cells in the freezer. 3️⃣ After the freezing cycle, transfer cells to liquid nitrogen. • Store the cryovials at temperatures below -130°C or in liquid nitrogen for long-term preservation. Ingredients • Contains FBS, DMSO, Glucose, Salts • Buffering capacity: pH = 7.2 to 7.6 Cytion’s Freeze Medium CM-1 offers a reliable solution for cryopreservation, ensuring high cell viability and functionality post-thaw for a wide range of research applications.

€99.00

excl. tax and shipping

Freeze Medium CM-1 - 50 ml

€59.00

excl. tax and shipping

Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3

Introducing Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, a specialized modification of Ham's F-12 medium designed to meet the unique requirements of biological research. This advanced medium offers distinct advantages, enhancing the cultivation of primary human hepatocytes, as well as rat and chicken liver cells, particularly in reduced serum conditions. Ham's F-12K (Kaighn's) Medium is carefully formulated to optimize cell culture conditions. It features an enriched composition, providing elevated levels of essential components such as amino acids and sodium pyruvate, as well as additional elements including putrescine, thymidine, hypoxanthine, and zinc. These additions enable researchers to supplement the medium with minimal serum or defined components for specific cell types, facilitating precise experimental conditions. Notably, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium does not contain proteins or growth factors. Consequently, supplementation with growth factors and Fetal Bovine Serum (FBS) is often necessary, allowing researchers to tailor the medium to the requirements of their specific cell lines. For optimal performance, the concentration of FBS must be carefully optimized for each cell line, ensuring optimal growth and functionality. To maintain physiological pH, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium employs a sodium bicarbonate buffer system (2.5 g/L), necessitating a controlled 5-10% CO2 environment during cultivation. This ensures the medium's pH remains within the ideal range for cell growth and viability. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing as well as warming up to +37°C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37°C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium but the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2H2O 135,24 Copper(II) sulfate x 5H2O 0,00 Iron (II) sulfate x 7H2O 0,83 Magnesium chloride x 6H2O 105,72 Magnesium sulfate x 7H2O 394,49 Potassium chloride 283,29 Potassium dihydrogen phosphate 58,52 Sodium chloride 7597,20 di-Sodium hydrogen phosphate anhydrous 115,02 Zinc sulfate x 7H2O 0,14 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 1260,00 Hypoxanthine 4,08 DL-α-Lipoic acid 0,21 Phenol red 3,00 Putrescine x 2HCl 0,32 Sodium pyruvate 220,00 NaHCO3 2500,00 Thymidine 0,73 Amino Acids L-Alanine 17,82 L-Arginine x HCl 421,40 L-Asparagine x H2O 30,02 L-Aspartic acid 26,62 L-Cysteine x HCl x H2O 70,24 L-Glutamine 292,20 L-Glutamic acid 29,42 Glycine 15,01 L-Histidine x HCl x H2O 41,92 L-Isoleucine 7,87 L-Leucine 26,24 L-Lysine x HCl 73,04 L-Methionine 8,95 L-Phenylalanine 9,91 L-Proline 69,06 L-Serine 21,02 L-Threonine 23,82 L-Tryptophan 4,08 L-Tyrosine 10,87 L-Valine 23,42 Vitamins D(+)-Biotin 0,07 D-Calcium pantothenate 0,48 Choline chloride 13,96 Folic acid 1,32 myo-Inositol 18,02 Nicotinamide 0,04 Pyridoxine x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Thiamine x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€108.00

excl. tax and shipping

Ham's F12 Medium, w: 1.0 mM stable Glutamine, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 1.176 g/L NaHCO3

Ham's F-12 Medium, also known as Ham's F-12 Nutrient Mix, is a widely used basal medium designed specifically for cell culture. It has been extensively employed for serum-free, single-cell plating of Chinese Hamster Ovary (CHO) cells, lung cells, and mouse L cells. Additionally, Ham’s F-12 is the medium of choice for a Clonal Toxicity Assay (CTA). One of its notable advantages is the ability to support cell growth without the need for serum supplementation. This eliminates potential interference caused by serum components, ensuring consistent and reliable experimental results. By providing a serum-free culture environment, Ham's F-12 Medium offers researchers greater control over their investigations. Another key feature of Ham's F-12 Medium is its suitability for single-cell plating. This makes it an excellent choice for a variety of cell lines, including CHO cells, lung cells, and mouse L cells. The medium's optimized nutrient composition facilitates efficient attachment and growth of individual cells, enabling the establishment of homogeneous cell cultures with improved reproducibility. Moreover, Ham's F-12 Medium has gained recognition as the preferred medium for the Clonal Toxicity Assay (CTA). This assay plays a critical role in assessing the cytotoxic effects of substances on cells. By utilizing Ham's F-12 Medium in the CTA, researchers can accurately evaluate the impact of various compounds or treatments on individual cells, providing valuable insights into toxicological profiles. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2H2O 44,00 Copper(II) sulfate x 5H2O 0,00 Iron (II) sulfate x 7H2O 0,83 Magnesium chloride x 6H2O 122,00 Potassium chloride 223,65 Sodium chloride 7599,00 di-Sodium hydrogen phosphate anhydrous 142,04 Zinc sulfate x 7H2O 0,86 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 1801,60 Hypoxanthine 4,08 Linoleic acid 0,08 DL-α-Lipoic acid 0,21 Phenol red 1,20 Putrescine x 2HCl 0,16 Sodium pyruvate 110,00 Thymidine 0,73 NaHCO3 1176,00 Amino Acids L-Alanine 8,91 L-Arginine x HCl 210,70 L-Asparagine x H2O 15,01 L-Aspartic acid 13,31 L-Cysteine x HCl x H2O 35,12 L-Alanyl-L-Glutamine 217,30 L-Glutamic acid 14,71 Glycine 7,51 L-Histidine x HCl x H2O 20,96 L-Isoleucine 3,94 L-Leucine 13,12 L-Lysine x HCl 36,54 L-Methionine 4,48 L-Phenylalanine 4,96 L-Proline 34,53 L-Serine 10,51 L-Threonine 11,91 L-Tryptophan 2,04 L-Tyrosine 5,44 L-Valine 11,71 Vitamins D(+)-Biotin 0,01 D-Calcium pantothenate 0,24 Choline chloride 13,96 Folic acid 1,32 myo-Inositol 18,02 Nicotinamide 0,04 Pyridoxine x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Thiamine x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€25.00

excl. tax and shipping

HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

excl. tax and shipping

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

excl. tax and shipping

สื่อเพาะเลี้ยงเซลล์: ภาพรวม

ในสาขาวิทยาศาสตร์ชีวภาพ หนึ่งในวิธีการที่สำคัญที่สุดคือการเพาะเลี้ยงเซลล์ การนำเซลล์ เนื้อเยื่อ หรืออวัยวะออกจากสัตว์หรือพืช และการนำเซลล์ เนื้อเยื่อ หรืออวัยวะเหล่านั้นไปปลูกฝังไว้ในสภาพแวดล้อมเทียมที่เอื้ออำนวยต่อการดำรงชีวิตและ/หรือการเจริญเติบโตของสิ่งมีชีวิตนั้น ๆ คือสิ่งที่หมายถึงคำว่า "การเพาะเลี้ยงเซลล์" ความต้องการด้านสิ่งแวดล้อมพื้นฐานสำหรับการพัฒนาเซลล์ที่เหมาะสมที่สุดคือ การควบคุมอุณหภูมิ พื้นผิวสำหรับเซลล์ยึดเกาะ สารอาหารที่เพียงพอสำหรับการเจริญเติบโต และตู้บ่มที่สามารถรักษาค่า pH และออสโมลาริตีที่เหมาะสมได้ เซลล์ต้องมีสภาพแวดล้อมเหล่านี้เพื่อให้สามารถเจริญเติบโตได้เต็มศักยภาพ

การเลือกใช้สื่อการเจริญเติบโตที่เหมาะสมสำหรับการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองเป็นขั้นตอนในกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีความสำคัญและจำเป็นอย่างยิ่ง อาหารเลี้ยงเชื้อ หรือที่รู้จักกันในชื่อ สารอาหารเพาะเลี้ยง เป็นของเหลวหรือเจลที่ถูกสังเคราะห์ขึ้นเพื่อส่งเสริมการพัฒนาของสิ่งมีชีวิตในระดับจุลทรรศน์ เซลล์ หรือคล้ายพืช อาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์มักมีแหล่งพลังงานและสารที่เพียงพอซึ่งควบคุมวงจรชีวิตของเซลล์ ส่วนประกอบหลักของอาหารเลี้ยงเชื้อประกอบด้วยกรดอะมิโน วิตามิน เกลือแร่ กลูโคส และซีรัม ซีรัมถูกเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อเนื่องจากทำหน้าที่เป็นแหล่งของปัจจัยการเจริญเติบโต ฮอร์โมน และปัจจัยการยึดเกาะ นอกจากให้สารอาหารแล้ว อาหารเลี้ยงเชื้อยังช่วยรักษาค่า pH และระดับออสโมลาลิตี้อีกด้วย

ประเภทของตัวกลางที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์

ทั้งเซลล์มนุษย์และเซลล์สัตว์มีศักยภาพที่จะถูกเพาะเลี้ยงในทั้งสภาพแวดล้อมเทียมหรือสังเคราะห์ หรือในสภาพแวดล้อมธรรมชาติที่เสริมด้วยธาตุธรรมชาติ ในต่อไปนี้ เราจะให้คุณทราบถึงภาพรวมของประเภทของสภาพแวดล้อมที่มีให้ใช้ในปัจจุบัน

สื่อธรรมชาติ

ของเหลวทางชีวภาพที่สามารถพบได้ในสื่อธรรมชาติได้เพียงของเหลวที่มีอยู่ในสภาพธรรมชาติเท่านั้น สื่อธรรมชาติมีประโยชน์มากและง่ายต่อการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์หลากหลายชนิดอย่างมาก การไม่เข้าใจส่วนประกอบที่แน่ชัดซึ่งประกอบกันเป็นสื่อธรรมชาติเป็นปัจจัยหลักที่ทำให้ผลลัพธ์ที่ได้จากการใช้สื่อธรรมชาติมีความซ้ำซ้อนต่ำ

สื่อเทียม

การเตรียมสื่อเทียมหรือสังเคราะห์เกี่ยวข้องกับการเติมสารอาหาร (ทั้งอินทรีย์และอนินทรีย์) โปรตีนจากซีรัม คาร์โบไฮเดรต โคแฟคเตอร์ วิตามิน และเกลือ รวมถึงก๊าซ O2 และ CO2 ในเฟสแก๊ส [1]

มีการพัฒนาสื่อเทียมหลากหลายประเภทขึ้นเพื่อตอบสนองหนึ่งหรือมากกว่าหนึ่งหน้าที่ดังต่อไปนี้: 1) การอยู่รอดทันที (สารละลายเกลือสมดุลที่มีค่า pH และความดันออสโมติกที่แม่นยำ) 2) การอยู่รอดเป็นเวลานาน (สารละลายเกลือสมดุลที่เสริมด้วยสูตรสารเคมีอินทรีย์และ/หรือซีรัมที่แตกต่างกัน) 3) การพัฒนาอย่างไม่มีกำหนด 4) ฟังก์ชันเฉพาะทาง

มีการจำแนกประเภทของสื่อเทียมออกเป็นสี่ประเภทที่แตกต่างกัน:

ซีรั่มที่มีสารอาหาร

ชนิดของสารเสริมที่พบได้บ่อยที่สุดในอาหารเลี้ยงเซลล์สัตว์ที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงคือเซรั่มจากเลือดของลูกวัวในครรภ์ (fetal bovine serum) โดยจะถูกเติมลงในอาหารเลี้ยงเซลล์เพื่อเป็นสารเสริมที่มีต้นทุนต่ำ เพื่อให้ได้สภาวะที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ นอกจากทำหน้าที่เป็นตัวขนส่งหรือตัวจับสารอาหารที่ไม่เสถียรหรือไม่ละลายน้ำ ฮอร์โมนและปัจจัยการเจริญเติบโต ตัวยับยั้งโปรตีเอส และสารอื่นๆ แล้ว ซีรั่มยังจับและทำให้โมเลกุลที่เป็นอันตรายเป็นกลางอีกด้วย

อาหารเลี้ยงเชื้อปราศจากซีรัม

การมีอยู่ของซีรัมในสื่อมีข้อเสียหลายประการและมีศักยภาพที่จะก่อให้เกิดข้อผิดพลาดสำคัญในการตีความในการวิจัยทางภูมิคุ้มกัน [2, 3] มีการสร้างสื่อปราศจากซีรัมหลากหลายรูปแบบขึ้นมาแล้ว [4, 5] สื่อเหล่านี้มักถูกพัฒนาขึ้นเป็นพิเศษเพื่อสนับสนุนการเพาะเลี้ยงของเซลล์ชนิดเดียว เช่น Knockout Serum Replacement และ Knockout DMEM จาก Thermo Fisher Scientific และ mTESR medium จาก Stem Cell Technologies [6] สำหรับเซลล์ต้นกำเนิด [7]

นอกจากนี้ สื่อเหล่านี้ยังประกอบด้วยปริมาณที่กำหนดไว้ของปัจจัยการเจริญเติบโตที่บริสุทธิ์, ไลโปโปรตีน, และโปรตีนอื่น ๆ ซึ่งโดยปกติแล้วจะได้รับจากซีรัม [8] สื่อเหล่านี้มักถูกเรียกว่า "สื่อเพาะเลี้ยงที่กำหนดไว้" เนื่องจากส่วนประกอบที่ประกอบขึ้นเป็นสื่อเหล่านี้เป็นที่เข้าใจกันดี

มีเดียที่กำหนดด้วยสารเคมี

สื่อเหล่านี้ประกอบด้วยส่วนประกอบอนินทรีย์และอินทรีย์ที่มีความบริสุทธิ์สูงมากซึ่งไม่ได้รับการปนเปื้อนจากสิ่งแปลกปลอมใด ๆ ทั้งสิ้น นอกจากนี้ยังอาจมีการเติมโปรตีนบริสุทธิ์ เช่น ปัจจัยการเจริญเติบโต ลงไปอีกด้วย

การดัดแปลงพันธุกรรมของแบคทีเรียหรือยีสต์ ร่วมกับการเติมกรดไขมัน วิตามิน คอเลสเตอรอล และกรดอะมิโนเฉพาะบางชนิด ส่งผลให้เกิดการผลิตส่วนประกอบของสิ่งเหล่านี้ [9]

อาหารเลี้ยงเชื้อปราศจากโปรตีน

อาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่มีโปรตีนคืออาหารที่ไม่มีการเติมโปรตีนเลย และประกอบด้วยองค์ประกอบที่ไม่ใช่โปรตีนเท่านั้น เมื่อเปรียบเทียบกับอาหารที่มีเซรั่มเติมเข้าไป การใช้สื่อที่ไม่มีโปรตีนเติมจะส่งเสริมการเพิ่มจำนวนของเซลล์และการแสดงออกของโปรตีนได้ดีขึ้น และทำให้การแยกผลิตภัณฑ์ที่เกิดขึ้นในกระบวนการต่อไปง่ายขึ้น [10-12] โปรตีนไม่ได้รวมอยู่ในสูตรอาหารเช่น MEM และ RPMI-1640 อย่างไรก็ตาม อาจมีการให้สารอาหารเสริมโปรตีนหากจำเป็น

อาหารเลี้ยงเชื้อและส่วนประกอบพื้นฐาน

อาหารเลี้ยงเชื้อเชิงพาณิชย์สามารถซื้อได้ทั้งในรูปแบบผงหรือของเหลว และมักประกอบด้วยสารอาหารหลากหลายชนิด เช่น กรดอะมิโน กลูโคส เกลือแร่ วิตามิน และสารอาหารเสริมอื่น ๆ

ความต้องการสำหรับส่วนประกอบเหล่านี้แตกต่างกันสำหรับแต่ละสายเซลล์ และความแตกต่างเหล่านี้เป็นสาเหตุให้เกิดจำนวนสูตรอาหารเลี้ยงเชื้อที่แตกต่างกันมากมาย แต่ละส่วนประกอบมีหน้าที่เฉพาะ ซึ่งจะอธิบายในย่อหน้าต่อไปนี้:

ระบบบัฟเฟอร์

เพื่อรักษาสภาพการเจริญเติบโตที่เหมาะสม pH ต้องได้รับการควบคุม ซึ่งมักทำโดยหนึ่งในสองระบบบัฟเฟอร์:

ระบบบัฟเฟอร์ธรรมชาติ

อัตราส่วนของ CO2/H2CO3 ในบรรยากาศเท่ากับอัตราส่วนในตัวกลาง ซึ่งสร้างกลไกการบัฟเฟอร์ตามธรรมชาติ เพื่อรักษาการบัฟเฟอร์ตามธรรมชาตินี้ไว้ สารละลายเพาะเลี้ยงต้องถูกเก็บไว้ในสภาพแวดล้อมที่มีอากาศประกอบด้วย CO2 5-10% ซึ่งมักทำได้โดยใช้ตู้เพาะเลี้ยงที่มี CO2 หนึ่งในสิ่งที่ดีที่สุดเกี่ยวกับการใช้บัฟเฟอร์ธรรมชาติคือราคาถูกและปลอดภัย

HEPES

การบัฟเฟอร์ทางเคมีโดยใช้ซวิตไทรออน HEPES มีความสามารถในการบัฟเฟอร์สูงกว่าในช่วง pH 7.2-7.4 และไม่จำเป็นต้องใช้สภาพแวดล้อมที่มีก๊าซควบคุม สำหรับเซลล์บางประเภท การใช้ HEPES ในปริมาณมากเกินไปอาจเป็นอันตรายได้ สื่อที่มี HEPES เช่นเดียวกันนั้นมีความไวต่อผลกระทบจากแสงฟลูออเรสเซนต์มากขึ้นอย่างมาก [13]

ฟีโนล เรด

สารบ่งชี้ค่า pH ฟีนอลเรดมักถูกใส่ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีจำหน่ายในเชิงพาณิชย์ ช่วยให้สามารถตรวจสอบค่า pH ได้อย่างต่อเนื่อง เมื่อเซลล์ขยายตัว สารเมตาบอไลต์ที่ผลิตโดยเซลล์เหล่านี้จะทำให้ค่า pH เปลี่ยนไป และส่งผลให้สีของอาหารเลี้ยงเชื้อก็เปลี่ยนไปด้วย ฟีโนลเรดมีผลสองประการต่อสีของอาหารเลี้ยงเชื้อ โดยเปลี่ยนเป็นสีเหลืองเมื่อมีค่า pH เป็นกรด และเปลี่ยนเป็นสีม่วงเมื่อมีค่า pH เป็นด่าง ที่ค่า pH 7.4 ซึ่งเป็นค่าที่เหมาะสมสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ อาหารเลี้ยงเชื้อจะปรากฏเป็นสีแดงเรืองแสง

แต่ฟีโนลเรดมีข้อเสียบางประการ: ประการแรก ฟีโนลเรดสามารถจำลองการทำงานของฮอร์โมนสเตียรอยด์หลายชนิดได้ โดยเฉพาะเอสโตรเจน [14] ดังนั้น เมื่อศึกษาเซลล์ที่ไวต่อเอสโตรเจน เช่น เนื้อเยื่อเต้านม จึงแนะนำให้ใช้สารอาหารที่ไม่มีฟีโนลเรด สมดุลโซเดียม-โพแทสเซียมถูกรบกวนจากการมีฟีนอลเรดในสูตรปราศจากซีรัมหลายชนิด การเติมซีรัมหรือฮอร์โมนต่อมใต้สมองของวัวลงในมีเดียอาจช่วยต้านผลนี้ได้ [15] ประการที่สาม การตรวจพบในทดลองโฟลว์ไซโตเมตริกถูกขัดขวางจากการมีฟีนอลเรด

เกลืออนินทรีย์

สื่อที่มีเกลืออนินทรีย์ เช่น ไอออนของโซเดียม โพแทสเซียม และแคลเซียม ช่วยรักษาสมดุลออสโมติกและควบคุมศักย์เยื่อหุ้มเซลล์

กรดอะมิโน

เนื่องจากกรดอะมิโนเป็นองค์ประกอบพื้นฐานของโปรตีน จึงเป็นองค์ประกอบที่จำเป็นของทุกสื่อการเจริญเติบโตของเซลล์ที่เคยคิดค้นขึ้นมา เนื่องจากเซลล์ไม่สามารถผลิตกรดอะมิโนบางชนิดได้เอง จึงเป็นสิ่งสำคัญที่สื่อเพาะเลี้ยงจะต้องมีกรดอะมิโนที่จำเป็นรวมอยู่ด้วย พวกมันจำเป็นสำหรับการเพิ่มจำนวนของเซลล์ และความเข้มข้นที่พวกมันมีอยู่จะกำหนดความหนาแน่นสูงสุดของเซลล์ที่สามารถเกิดขึ้นได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง แอล-กลูตามีน ซึ่งเป็นกรดอะมิโนที่จำเป็น มีความสำคัญอย่างยิ่ง

แอล-กลูตามีนทำหน้าที่เป็นแหล่งพลังงานรองสำหรับการเผาผลาญและช่วยให้นิโตรเจนในการผลิต NAD, NADPH และนิวคลีโอไทด์ เนื่องจากแอล-กลูตามีนเป็นกรดอะมิโนที่ไม่เสถียรซึ่งเมื่อเวลาผ่านไปจะเปลี่ยนเป็นรูปแบบที่เซลล์ไม่สามารถใช้ได้ จึงจำเป็นต้องให้แอล-กลูตามีนแก่สื่อ

นอกจากนี้ กรดอะมิโนที่ไม่จำเป็นอาจถูกเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อเพื่อเติมเต็มกรดอะมิโนที่ถูกใช้ไปตลอดกระบวนการเจริญเติบโต การเจริญเติบโตของเซลล์จะเพิ่มขึ้นและความสามารถในการดำรงชีวิตของเซลล์จะเพิ่มขึ้นเมื่ออาหารเลี้ยงเชื้อถูกเติมด้วยกรดอะมิโนที่ไม่จำเป็น

คาร์โบไฮเดรต

คาร์โบไฮเดรตในรูปแบบของน้ำตาลเป็นแหล่งพลังงานหลัก สื่อหลายชนิดยังรวมถึงมอลโตสและฟรุกโตส นอกเหนือจากน้ำตาลที่พบได้ทั่วไปอย่างกลูโคสและกาแลคโตส

โปรตีนและเปปไทด์

อัลบูมิน, ทรานส์เฟอริน, และไฟโบรเนกติน เป็นโปรตีนและเปปไทด์ที่ใช้กันมากที่สุด พวกมันมีความสำคัญเป็นพิเศษในสื่อที่ไม่มีซีรัม อัลบูมิน, ทรานส์เฟอริน, อะโปรตีนิ, เฟทูอิน, และไฟโบรเนกติน เป็นโปรตีนบางชนิดที่อาจพบได้ในซีรัม ซึ่งเป็นแหล่งโปรตีนที่อุดมสมบูรณ์

อัลบูมินเป็นโปรตีนหลักที่พบในเลือด โดยมีหน้าที่จับและลำเลียงสารต่าง ๆ เช่น น้ำ เกลือแร่ กรดไขมันอิสระ ฮอร์โมน และวิตามิน ระหว่างอวัยวะและเซลล์ต่าง ๆ ความสามารถของอัลบูมินในการจับกับสารเคมีทำให้เป็นทางเลือกที่มีประสิทธิภาพในการกำจัดสารประกอบที่เป็นอันตรายออกจากสารละลายที่ใช้เพาะเลี้ยงเซลล์

อะโปรทินินเป็นสารป้องกันในระบบเพาะเลี้ยงเซลล์ เนื่องจากมีความเสถียรที่ค่า pH ที่เป็นกลางและกรด รวมถึงทนต่ออุณหภูมิสูงและการทำลายที่อาจเกิดจากเอนไซม์โปรตีโอไลติก นอกจากนี้ยังสามารถยับยั้งเอนไซม์เซรีนโปรตีเอสหลายชนิด รวมถึงทริปซิน

ฟีทูอินเป็นไกลโคโปรตีนที่อาจตรวจพบได้ในปริมาณที่สูงกว่าในซีรัมของสัตว์ในครรภ์และสัตว์แรกเกิดเมื่อเทียบกับซีรัมของสัตว์ที่โตเต็มวัย นอกจากนี้ ฟีทูอินยังทำหน้าที่เป็นสารยับยั้งเซรีนโปรตีเอส โปรตีนไฟโบรเนกตินเป็นองค์ประกอบที่สำคัญในกระบวนการยึดเกาะของเซลล์ ทรานส์เฟอร์รินเป็นโปรตีนที่ทำหน้าที่ขนส่งเหล็กและมีหน้าที่นำเหล็กไปยังเยื่อหุ้มเซลล์

กรดไขมันและไขมัน

พวกมันมีบทบาทสำคัญในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่มีซีรัมเมื่อไม่มีซีรัม

วิตามิน

วิตามินหลายชนิดมีความจำเป็นต่อการพัฒนาและการเพิ่มจำนวนของเซลล์ วิตามินไม่สามารถผลิตได้ในปริมาณที่เพียงพอโดยเซลล์ ดังนั้นจึงมีความสำคัญในวัฒนธรรมเนื้อเยื่อในฐานะอาหารเสริม

ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ซีรัมเป็นแหล่งวิตามินหลัก อย่างไรก็ตาม สารอาหารยังได้รับการเติมวิตามินต่างๆ เพื่อให้เหมาะสมกับชนิดของเซลล์ที่ต้องการ โดยทั่วไป วิตามินกลุ่มบีจะถูกใช้เพื่อกระตุ้นการเจริญเติบโต

ธาตุอาหารรอง

ธาตุเคมี เช่น ทองแดง สังกะสี ซีลีเนียม และสารตัวกลางของกรดไตรคาร์บอกซิลิก เป็นที่รู้จักกันในชื่อธาตุอาหารรอง ธาตุอาหารรองมักถูกเติมลงในสื่อที่ไม่รวมซีรัมเพื่อทดแทนธาตุที่มักพบในซีรัม ธาตุเหล่านี้เป็นองค์ประกอบทางเคมีที่สำคัญซึ่งจำเป็นต่อการพัฒนาของเซลล์ที่มีสุขภาพดี ปฏิกิริยาชีวเคมีหลายชนิดขึ้นอยู่กับสารอาหารรองบางชนิด เช่น การทำงานของเอนไซม์

อาหารเสริมขนาดกลาง

อาหารเลี้ยงเชื้อแบบสมบูรณ์ที่แนะนำสำหรับเซลล์ไลน์บางชนิดจำเป็นต้องมีส่วนประกอบเพิ่มเติมที่ไม่ได้อยู่ในอาหารพื้นฐานและซีรัม สารอาหารเสริมเหล่านี้ช่วยสนับสนุนการเจริญเติบโตของเซลล์และการทำงานเมตาบอลิซึมที่เหมาะสม

แม้ว่าฮอร์โมน ปัจจัยการเจริญเติบโต และโมเลกุลสัญญาณจะมีความจำเป็นต่อการเพิ่มจำนวนของเซลล์สายพันธุ์เฉพาะอย่างเหมาะสม แต่ควรปฏิบัติตามข้อควรระวังดังต่อไปนี้เสมอ: เนื่องจากการเติมสารเสริมอาจเปลี่ยนแปลงค่าออสโมลาริตีของอาหารเลี้ยงเซลล์ทั้งหมด ซึ่งอาจยับยั้งการพัฒนาของเซลล์ จึงควรตรวจสอบค่าออสโมลาริตีหลังจากเติมสารเสริมทุกครั้ง สำหรับเซลล์ไลน์ส่วนใหญ่ ค่าความเข้มข้นของออสโมลาลิตี้ที่เหมาะสมอยู่ระหว่าง 260 ถึง 320 mOSM/กก.

ยาปฏิชีวนะ

ยาปฏิชีวนะมักถูกนำมาใช้เพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตของสารปนเปื้อนจากแบคทีเรียและเชื้อรา [16] แม้ว่ายาปฏิชีวนะจะไม่ใช่สิ่งจำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ก็ตาม เนื่องจากยาปฏิชีวนะอาจปกปิดการปนเปื้อนของไมโคพลาสมาและแบคทีเรียที่ต้านทานยาได้ การใช้ยาปฏิชีวนะเป็นประจำจึงไม่ได้รับการแนะนำสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ [17, 18]

นอกจากนี้ ยาปฏิชีวนะอาจรบกวนการเผาผลาญของเซลล์ที่มีความไวต่อสิ่งกระตุ้นสูง การผสมผสานระหว่างเพนิซิลลินและสเตรปโตมัยซินที่ผลิตโดย MilliporeSigma และ Life Technologies มักถูกนำมาใช้ Plasmocin ได้ถูกนำมาใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์ของเนื้องอกในสมองชนิด glioma ได้แก่ TS603, TS516 และ BT260 [19] และได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพในการกำจัดเชื้อไมโคพลาสมาที่ปนเปื้อน (20)

ซีรั่ม

อัลบูมิน, ปัจจัยการเจริญเติบโต, และสารยับยั้งการเจริญเติบโต ล้วนมีอยู่ในซีรัม ซีรัมเป็นหนึ่งในส่วนประกอบที่สำคัญที่สุดของอาหารเลี้ยงเซลล์ เนื่องจากมันให้กรดอะมิโน, โปรตีน, วิตามิน (โดยเฉพาะวิตามินที่ละลายในไขมัน เช่น วิตามิน A, D, E, และ K), คาร์โบไฮเดรต, ไขมัน, ฮอร์โมน, ปัจจัยการเจริญเติบโต, แร่ธาตุ, และธาตุอาหารที่จำเป็นในปริมาณน้อย

ซีรั่มจากแหล่งรกและลูกวัวมักถูกนำมาใช้เพื่อส่งเสริมการพัฒนาของเซลล์เพาะเลี้ยง ซีรั่มจากรกเป็นแหล่งที่อุดมไปด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตและเหมาะสมสำหรับการโคลนนิ่งเซลล์และการพัฒนาเซลล์ที่มีความไวสูง เนื่องจากความสามารถในการส่งเสริมการเจริญเติบโตที่ลดลง ซีรั่มจากลูกวัวจึงถูกนำมาใช้ในการทดลองเกี่ยวกับการยับยั้งการเจริญเติบโตแบบสัมผัส อาหารเลี้ยงเชื้อปกติมักประกอบด้วยซีรัม 2% ถึง 10% การเติมซีรัมลงในอาหารเพาะเลี้ยงมีวัตถุประสงค์ดังต่อไปนี้ [21]:

เซรั่มนี้ส่งมอบสารอาหารที่จำเป็นสำหรับเซลล์ (ทั้งในรูปแบบที่ละลายอยู่ในสารละลายและที่เกาะติดกับโปรตีน)
ปัจจัยการเจริญเติบโตและฮอร์โมนหลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับการส่งเสริมการเจริญเติบโตและการทำงานของเซลล์เฉพาะทางถูกบรรจุอยู่ในซีรัม
มันมีโปรตีนที่จับกับสารต่าง ๆ มากมาย เช่น อัลบูมินและทรานส์เฟอร์ริน ซึ่งทำหน้าที่ขนส่งสารเคมีอื่น ๆ เข้าสู่เซลล์ ตัวอย่างเช่น อัลบูมินจะลำเลียงไขมัน วิตามิน ฮอร์โมน ฯลฯ เข้าสู่เซลล์
นอกจากนี้ยังให้โปรตีน เช่น ไฟโบรเนคติน ซึ่งช่วยเพิ่มการยึดเกาะของเซลล์กับพื้นผิว นอกจากนี้ยังผลิตองค์ประกอบที่ช่วยในการแพร่กระจายซึ่งช่วยในการขยายตัวของเซลล์ก่อนการแบ่งตัว
มันส่งมอบโปรตีเอสอินฮิบิเตอร์ที่ป้องกันการสลายโปรตีนในเซลล์
นอกจากนี้ยังมีแร่ธาตุเช่น Na+, K+, Zn2+ และ Fe2+
มันช่วยเพิ่มความหนืดของสื่อ จึงช่วยปกป้องเซลล์จากการบาดเจ็บทางกลระหว่างการเขย่าในวัฒนธรรมแบบแขวนลอย
มันยังเป็นกันชนด้วย

เอกสารอ้างอิง

[1] มอร์แกน เจ, มอร์ตัน เอช, พาร์คเกอร์ อาร์. โภชนาการของเซลล์สัตว์ในวัฒนธรรมเนื้อเยื่อ; การศึกษาเบื้องต้นเกี่ยวกับอาหารสังเคราะห์. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. การดูดซับอย่างรวดเร็วของส่วนประกอบในซีรั่มลูกวัวโดยเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมในวัฒนธรรม. แหล่งที่มาที่เป็นไปได้ของสิ่งประดิษฐ์ในการศึกษาแอนติซีรั่มต่อแอนติเจนเฉพาะเซลล์. ภูมิคุ้มกันวิทยา. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. การเติมซีรัมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการเตรียมสารแขวนลอยของเซลล์เป็นแหล่งที่มาของสิ่งผิดปกติในปฏิกิริยาที่เซลล์เป็นสื่อกลางซึ่งศึกษาโดยใช้การทดสอบต่อมน้ำเหลืองบริเวณขาหนีบ J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] มาริอาเนอี, มาริอาเนอา, มอนาโกเอ็ม, ลาลีอี, วิตัลีเอ็ม, ฟาชินีอา. สื่อเลี้ยงเซลล์เชิงพาณิชย์ปราศจากซีรัม: การเจริญเติบโตของไฮบริโดมาและการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอล. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] บาร์นส์ ดี, ซาโตะ จี. วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ในอาหารเลี้ยงเชื้อปราศจากซีรัม. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, และคณะ. HSP70 ชำระ RNA-free TDP-43 เข้าไปในเปลือกทรงกลมของเหลวภายในนิวเคลียสที่ไม่เป็นเนื้อเดียวกัน. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, และคณะ. การชราภาพที่เกิดจากกลุ่มอาการดาวน์รบกวนโครงสร้างนิวเคลียร์ของเซลล์ต้นกำเนิดประสาท. เซลล์ สเต็มเซลล์. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. การแทนที่ซีรัมทั้งหมดด้วยอัลบูมิน, ทรานส์เฟอริน และลิพิดจากถั่วเหลืองในวัฒนธรรมของเซลล์บีลิมโฟไซต์ที่ตอบสนองต่อลิโพโพลีแซ็กคาไรด์. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. การปรับปรุงอย่างเป็นระบบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่กำหนดด้วยสารเคมีและปราศจากโปรตีนสำหรับการเจริญเติบโตของไฮบริโดมาและการผลิตแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] ดาร์ฟเลอร์ เอฟ. สารอาหารปราศจากโปรตีนสำหรับการเจริญเติบโตของไฮบริโดมาและเซลล์อื่น ๆ ของระบบภูมิคุ้มกัน. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] บาร์นส์ ดี, ซาโตะ จี. การเพาะเลี้ยงเซลล์ปลอดซีรัม: แนวทางที่เป็นหนึ่งเดียว. เซลล์. 1980;22:649-55

[12] แฮมิลตัน ดับเบิลยู, แฮม อาร์. การเจริญเติบโตแบบโคลนของสายพันธุ์เซลล์แฮมสเตอร์จีนในอาหารเลี้ยงเซลล์ปราศจากโปรตีน. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. การวิเคราะห์ผลของสารพิษต่อเซลล์ของอาหารเพาะเลี้ยงที่มี HEPES ซึ่งได้รับแสง. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. ฟีนอลแดงในอาหารเลี้ยงเซลล์เนื้อเยื่อเป็นเอสโตรเจนอ่อน: ผลกระทบต่อการศึกษาเซลล์ที่ตอบสนองต่อเอสโตรเจนในวัฒนธรรม. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] คาร์เมียล เอส. การพัฒนาสื่อปลอดซีรัม. ใน: มาสเตอร์ เจอาร์ดับเบิลยู, บรรณาธิการ. การเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์, ฉบับที่ 3. ออกซฟอร์ด: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยออกซฟอร์ด; 2000.

[16] Perlman D. การใช้ยาปฏิชีวนะในอาหารเลี้ยงเซลล์. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. การแพร่กระจายและการควบคุมการติดเชื้อไมโคพลาสมาในวัฒนธรรมเซลล์ In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. การเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์และการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ในหลอดทดลอง. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] จักรวรรตี เอ, เลาคก้า ที, มิลลิโคสกี เอ็ม, ริงเกล เอ, บุ๊คเกอร์ เอ็ม, โทลสตอร์คูคอฟ เอ็ม, และคณะ. เฮสโตน เดเมทิลเอส KDM6A ตรวจจับออกซิเจนโดยตรงเพื่อควบคุมโครมาตินและชะตากรรมของเซลล์. วิทยาศาสตร์. 2019;363:1217-1222

[20] โมลลา คาเซมีฮา วี, อาซารี เอส, อามันซาเดห์ เอ, โบนาคดาร์ เอส, โชจาอี มอกดาห์ม เอ็ม, Habibi Anbouhi M, et al. ประสิทธิภาพของ Plasmocin™ ต่อเซลล์สายพันธุ์ต่างๆ ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่ติดเชื้อโมลลิคูทเมื่อเปรียบเทียบกับยาปฏิชีวนะที่ใช้กันทั่วไปในการเพาะเลี้ยงเซลล์: ประสบการณ์ในท้องถิ่น. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. แง่มุมทางโมเลกุลของการจับสารลิแกนด์กับอัลบูมินในซีรัม. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53