İçeriğe atla
HROG17 T1 M1
Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma

HROG17 T1 M1

Cell line · Ürün numarası 300875

HROG17 T1 M1, WH tanısı konmuş bir yetişkin hastadan rezeke edilen bir tümör örneğinden elde edilen birincil insan glioblastoma multiforme (GBM) hücre hattıdır...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HROG17 T1 M1, WHO derece IV glioblastoma tanısı konmuş bir yetişkin hastadan rezeke edilen tümör örneğinden oluşturulan birincil insan glioblastoma multiforme (GBM) hücre hattıdır. "T1" adı, numunenin ilk cerrahi müdahale sırasında alındığını, "M1" ise bu tümörden elde edilen karşılık gelen in vitro modeli ifade eder. Hücre hattı, hastaya özgü moleküler ve fenotipik özellikleri koruyan ultra düşük pasajlı glioma kültürleri oluşturmaya odaklanan HROG (Hansestadt Rostock Glioma) platformu içinde üretilmiştir.

HROG17 T1 M1, standart kültür koşullarında yapışkan bir şekilde büyür ve birincil GBM kültürleri için tipik olan fibroblast benzeri bir morfoloji sergiler. HROG'dan türetilen hatların immünofenotipik karakterizasyonu, yüksek dereceli astrositik tümör kökeniyle tutarlı olarak glial fibriler asidik protein (GFAP), nestin ve vimentin gibi glial ve nöral soy ile ilişkili belirteçlerin ekspresyonunu gösterir. HROG koleksiyonundaki moleküler profilleme, MGMT promotör metilasyonu, EGFR amplifikasyon durumu ve TP53, IDH1/2, KRAS ve BRAF gibi anahtar genlerin mutasyon analizi gibi klinik olarak ilgili parametrelerin değerlendirilmesini içerir ve kültürde tümöre özgü genomik değişikliklerin korunmasını destekler.

HROG17 T1 M1, alkilleyici kemoterapötikler ve ek hedefli bileşikler dahil olmak üzere glioblastoma için standart tedavi ajanlarına duyarlılığı değerlendirmek için kullanılmıştır. HROG modelleri arasında yapılan karşılaştırmalı analizler, düşük pasajlı kültürlerin erken pasajlarda stabil morfoloji, büyüme kinetiği ve ilaç yanıt profillerini koruduğunu göstermektedir. Hastadan elde edilen, düşük pasajlı bir glioblastoma modeli olan HROG17 T1 M1, yüksek dereceli gliomada tümör biyolojisi, terapötik yanıt ve tümörler arası heterojenliği incelemek için klinik olarak ilgili bir in vitro platform sağlar.

Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HROG17 T1 M1 (Cytion katalog numarası 300875)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
TrypLE Express, 37°C, 10 dakika,
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, iyileşmeyi artırmak ve kriyo kaynaklı stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren %50 bazal ortam + %40 FBS + %10 DMSO veya CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

06Bağışçı

Bağışçının yaşı
70 yıl
Etnik köken
Kafkas