Ga naar de inhoud
HROG17 T1 M1
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Glioblastoom

Documenten

HROG17 T1 M1

Cell line · Productnummer 300875

HROG17 T1 M1 is een primaire menselijke glioblastoma multiforme (GBM)-cellijn die is opgezet uit een tumormonster dat is verwijderd bij een volwassen patiënt bij wie WH was vastgesteld...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HROG17 T1 M1 is een primaire humane glioblastoma multiforme (GBM) cellijn die is opgezet uit een tumormonster dat is verwijderd bij een volwassen patiënt met de diagnose WHO-graad IV glioblastoma. De aanduiding "T1" geeft aan dat het monster werd verkregen tijdens de eerste chirurgische ingreep, terwijl "M1" verwijst naar het overeenkomstige in-vitromodel dat van deze tumor is afgeleid. De cellijn werd gegenereerd binnen het HROG-platform (Hansestadt Rostock Glioma), dat zich richt op het opzetten van gliomaculturen met een ultralaag aantal passages die de patiëntspecifieke moleculaire en fenotypische kenmerken behouden.

HROG17 T1 M1 groeit onder standaard kweekomstandigheden en vertoont een fibroblast-achtige morfologie die typisch is voor primaire GBM-culturen. Immunofenotypische karakterisering van HROG-afgeleide lijnen toont de expressie aan van gliale en neurale afstammingsgerelateerde markers, zoals gliale fibrillaire zure proteïne (GFAP), nestine en vimentine, wat consistent is met de oorsprong van hooggradige astrocytaire tumoren. Moleculaire profilering binnen de HROG-collectie omvat evaluatie van klinisch relevante parameters zoals MGMT-promotormethylatie, EGFR-amplificatiestatus en mutatieanalyse van belangrijke genen, waaronder TP53, IDH1/2, KRAS en BRAF, wat het behoud van tumorspecifieke genomische veranderingen in kweek ondersteunt.

HROG17 T1 M1 is gebruikt om de gevoeligheid voor standaardbehandelingen voor glioblastoom te beoordelen, waaronder alkylerende chemotherapeutica en aanvullende gerichte verbindingen. Vergelijkende analyses tussen HROG-modellen geven aan dat culturen met een laag aantal passages een stabiele morfologie, groeikinetiek en geneesmiddelresponsprofielen behouden tijdens de vroege passages. Als een van patiënten afkomstig glioblastoommodel met een laag aantal passages biedt HROG17 T1 M1 een klinisch relevant in-vitroplatform voor het bestuderen van tumorbiologie, therapeutische respons en intertumorale heterogeniteit bij hooggradige gliomen.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Glioblastoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
HROG17 T1 M1 (Cytion catalogusnummer 300875)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
TrypLE Express, 37°C, 10 min,
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

06Donateur

Leeftijd van de donor
70 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch