Μετάβαση στο περιεχόμενο
HROG17 T1 M1
Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Γλοιοβλάστωμα

Έγγραφα

HROG17 T1 M1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300875

Η HROG17 T1 M1 είναι μια πρωτογενής ανθρώπινη κυτταρική σειρά πολυμορφικού γλοιοβλαστώματος (GBM), η οποία δημιουργήθηκε από δείγμα όγκου που αφαιρέθηκε από ενήλικα ασθενή με διάγνωση WH...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Το HROG17 T1 M1 είναι μια πρωτογενής κυτταρική σειρά πολυμορφικού γλοιοβλαστώματος (GBM) του ανθρώπου, που δημιουργήθηκε από δείγμα όγκου που αφαιρέθηκε από ενήλικα ασθενή με διάγνωση γλοιοβλαστώματος βαθμού IV κατά WHO. Ο χαρακτηρισμός «T1» υποδηλώνει ότι το δείγμα ελήφθη κατά την πρώτη χειρουργική επέμβαση, ενώ «M1» υποδηλώνει το αντίστοιχο in vitro μοντέλο που προέρχεται από αυτόν τον όγκο. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε στο πλαίσιο της πλατφόρμας HROG (Hansestadt Rostock Glioma), η οποία επικεντρώνεται στη δημιουργία καλλιεργειών γλοιωμάτων εξαιρετικά χαμηλής διέλευσης που διατηρούν τα μοριακά και φαινοτυπικά χαρακτηριστικά του κάθε ασθενούς.

Το HROG17 T1 M1 αναπτύσσεται με προσκόλληση υπό τυπικές συνθήκες καλλιέργειας και εμφανίζει μορφολογία τύπου ινοβλαστών, χαρακτηριστική των πρωτογενών καλλιεργειών GBM. Ο ανοσοφαινοτυπικός χαρακτηρισμός των σειρών που προέρχονται από το HROG καταδεικνύει την έκφραση δεικτών που σχετίζονται με τη γλοιακή και νευρική καταγωγή, όπως η γλοιακή ινώδης όξινη πρωτεΐνη (GFAP), η νεστίνη και η βιμεντίνη, σύμφωνα με την προέλευση του όγκου από αστροκύτταρα υψηλού βαθμού. Ο μοριακός χαρακτηρισμός της συλλογής HROG περιλαμβάνει την αξιολόγηση κλινικά σχετικών παραμέτρων, όπως η μεθυλίωση του προαγωγού MGMT, η κατάσταση ενίσχυσης του EGFR και η ανάλυση μεταλλάξεων βασικών γονιδίων, συμπεριλαμβανομένων των TP53, IDH1/2, KRAS και BRAF, υποστηρίζοντας τη διατήρηση των ειδικών για τον όγκο γονιδιακών αλλοιώσεων στην καλλιέργεια.

Το HROG17 T1 M1 έχει χρησιμοποιηθεί για την αξιολόγηση της ευαισθησίας σε παράγοντες πρότυπου θεραπείας για το γλοιοβλάστωμα, συμπεριλαμβανομένων αλκυλιωτικών χημειοθεραπευτικών και πρόσθετων στοχευμένων ενώσεων. Συγκριτικές αναλύσεις σε όλα τα μοντέλα HROG δείχνουν ότι οι καλλιέργειες χαμηλού περάσματος διατηρούν σταθερή μορφολογία, κινητική ανάπτυξης και προφίλ απόκρισης στα φάρμακα κατά τα πρώτα περάσματα. Ως μοντέλο γλοιοβλαστώματος χαμηλού περάσματος που προέρχεται από ασθενή, το HROG17 T1 M1 παρέχει μια κλινικά σχετική in vitro πλατφόρμα για τη μελέτη της βιολογίας του όγκου, της θεραπευτικής απόκρισης και της ενδο-όγκου ετερογένειας σε γλοιώματα υψηλού βαθμού.

Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Γλοιοβλάστωμα

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HROG17 T1 M1 (αριθμός καταλόγου Cytion 300875)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_B7FQ

04Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
TrypLE Express, 37°C, 10 λεπτά,
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε 50% βασικό μέσο + 40% FBS + 10% DMSO ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

06Δωρητής

Ηλικία δωρητή
70 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος