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HROG17 T1 M1
ティッシュ
脳
病気
膠芽腫

HROG17 T1 M1

Cell line · 製品番号 300875

HROG17 T1 M1は、WHと診断された成人患者から切除された腫瘍標本から樹立された、ヒト原発性多形性膠芽腫(GBM)細胞株である...

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01概要

説明

HROG17 T1 M1は、WHOグレードIV膠芽腫と診断された成人患者から摘出された腫瘍検体から樹立されたヒト原発性多形性膠芽腫(GBM)細胞株である。 「T1」の表記は初回手術時点での検体採取を示し、「M1」は当該腫瘍由来の対応するin vitroモデルを意味する。本細胞株はHROG(ハンザシュタット・ロストック膠芽腫)プラットフォーム内で樹立され、患者固有の分子的・表現型的特性を保持する超低継代膠芽腫培養系の確立に焦点を当てている。

HROG17 T1 M1は標準培養条件下で接着性増殖を示し、原発性GBM培養に典型的な線維芽細胞様形態を呈する。HROG由来株の免疫表現型解析では、グリア線維酸性タンパク質(GFAP)、ネスチン、ビメンチンなどのグリア系および神経系マーカーの発現が確認され、高悪性度星細胞腫起源と一致する。 HROGコレクション内の分子プロファイリングには、MGMTプロモーターメチル化、EGFR増幅状態、TP53、IDH1/2、KRAS、BRAFなどの主要遺伝子の変異解析といった臨床関連パラメータの評価が含まれ、培養における腫瘍特異的ゲノム変異の保持を裏付けている。

HROG17 T1 M1 は、アルキル化化学療法剤やその他の標的化合物など、膠芽腫の標準治療薬に対する感受性を評価するために使用されています。 HROGモデル間の比較解析により、低継代培養は初期継代において形態、増殖動態、薬剤応答プロファイルを安定に維持することが示されている。患者由来の低継代膠芽腫モデルであるHROG17 T1 M1は、高悪性度膠腫における腫瘍生物学、治療反応性、腫瘍間異質性を研究するための臨床的に関連性の高いin vitroプラットフォームを提供する。

ティッシュ
脳
病気
膠芽腫

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03識別子

引用
HROG17 T1 M1(サイシオン カタログ番号 300875)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_B7FQ

04取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
TrypLE Express、37℃、10分間、
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、50%基礎培地+40%FBS+10%DMSO、またはCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用する。この培地には、回復を促進し、凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤が含まれている。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

06寄付者

ドナーの年齢
70年
民族
白人