Gå direkt till innehållet
HROG17 T1 M1
Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Glioblastom

HROG17 T1 M1

Cell line · Produktnummer 300875

HROG17 T1 M1 är en primär human glioblastoma multiforme (GBM)-cellinje som etablerats från ett tumörprov som avlägsnats från en vuxen patient som diagnostiserats med WH...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HROG17 T1 M1 är en primär human glioblastoma multiforme (GBM)-cellinje som etablerats från ett tumörprov som resekerats från en vuxen patient diagnostiserad med WHO-grad IV glioblastom. Beteckningen ”T1” indikerar att provet erhölls vid den första operationstillfället, medan ”M1” betecknar motsvarande in vitro-modell som härrör från denna tumör. Cellinjen genererades inom HROG-plattformen (Hansestadt Rostock Glioma), som fokuserar på att etablera gliomkulturer med extremt låg passage som bevarar patientspecifika molekylära och fenotypiska egenskaper.

HROG17 T1 M1 växer vidhäftande under standardodlingsförhållanden och uppvisar en fibroblastliknande morfologi som är typisk för primära GBM-odlingar. Immunofenotypisk karakterisering av HROG-härledda linjer visar uttryck av glial- och neural linjeassocierade markörer såsom glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestin och vimentin, vilket överensstämmer med höggradig astrocytisk tumörursprung. Molekylär profilering inom HROG-samlingen inkluderar utvärdering av kliniskt relevanta parametrar såsom MGMT-promotormetylering, EGFR-amplifieringsstatus och mutationsanalys av nyckelgener inklusive TP53, IDH1/2, KRAS och BRAF, vilket stöder bevarandet av tumörspecifika genomiska förändringar i odlingen.

HROG17 T1 M1 har använts för att bedöma känsligheten för standardbehandlingar mot glioblastom, inklusive alkylerande kemoterapeutika och ytterligare målinriktade föreningar. Jämförande analyser mellan HROG-modellerna indikerar att odlingar med få passager bibehåller stabil morfologi, tillväxtkinetik och läkemedelsresponsprofiler under de tidiga passagerna. Som en patienthärledd glioblastommodell med få passager utgör HROG17 T1 M1 en kliniskt relevant in vitro-plattform för att studera tumörbiologi, terapeutisk respons och intertumoral heterogenitet i höggradiga gliom.

Vävnad
Hjärna
Sjukdom
Glioblastom

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Identifierare

Källa
HROG17 T1 M1 (Cytion katalognummer 300875)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
TrypLE Express, 37°C, 10 min,
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

06Donator

Donatorns ålder
70 år
Etnicitet
Kaukasisk