Tartalomra ugrás
HROG17 T1 M1
Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma

Dokumentumok

HROG17 T1 M1

Cell line · Termékszám 300875

A HROG17 T1 M1 egy primer humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy WH-diagnózissal rendelkező felnőtt betegből eltávolított daganati mintából állítottak elő...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HROG17 T1 M1 egy elsődleges humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy WHO IV. fokozatú glioblastomával diagnosztizált felnőtt betegtől eltávolított tumor mintából hoztak létre. A „T1” jelölés azt jelzi, hogy a mintát az első műtéti időpontban vették, míg az „M1” jelölés a tumorból származó megfelelő in vitro modellt jelöli. A sejtvonalat a HROG (Hansestadt Rostock Glioma) platformon hozták létre, amelynek célja olyan ultra-alacsony passzálású glióma kultúrák létrehozása, amelyek megőrzik a betegspecifikus molekuláris és fenotípusos jellemzőket.

A HROG17 T1 M1 standard tenyésztési körülmények között adhezív módon növekszik, és a primer GBM-tenyészetekre jellemző fibroblaszt-szerű morfológiát mutat. A HROG-ból származó vonalak immunfenotípusos jellemzése glia- és idegsejt-vonalhoz kapcsolódó markerek, például glia fibrilláris savas fehérje (GFAP), nestin és vimentin expresszióját mutatja, ami összhangban áll a magas fokú asztrocitás tumor eredetével. A HROG-gyűjtemény molekuláris profilozása magában foglalja a klinikailag releváns paraméterek értékelését, mint például az MGMT promóter metilációja, az EGFR amplifikációs státusza, valamint a kulcsfontosságú gének mutációs elemzése, beleértve a TP53, IDH1/2, KRAS és BRAF géneket, ami támogatja a tumor-specifikus genomikus változások megőrzését a kultúrában.

A HROG17 T1 M1-et a glioblastoma standard kezelési módszereinek, beleértve az alkilező kemoterápiás szerek és további célzott vegyületek iránti érzékenységének értékelésére használták. A HROG modellek közötti összehasonlító elemzések azt mutatják, hogy az alacsony passzálású kultúrák stabil morfológiát, növekedési kinetikát és gyógyszerre adott válaszprofilokat tartanak fenn a korai passzálások során. Betegektől származó, alacsony passzálású glioblastoma modellként a HROG17 T1 M1 klinikailag releváns in vitro platformot biztosít a tumorbiológia, a terápiás válasz és a daganatok közötti heterogenitás tanulmányozásához a magas fokú gliómákban.

Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Azonosítók

Hivatkozás
HROG17 T1 M1 (Cytion katalógusszám: 300875)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
TrypLE Express, 37°C, 10 perc,
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

06Adományozó

Az adományozó életkora
70 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi