Gå til innholdet
HROG17 T1 M1
Vev
Hjerne
Sykdom
Glioblastom

Dokumenter

HROG17 T1 M1

Cell line · Produktnummer 300875

HROG17 T1 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM)-cellelinje som er etablert fra en svulstprøve hentet fra en voksen pasient som hadde fått diagnosen WH...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HROG17 T1 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM) cellelinje etablert fra en tumorprøve resektert fra en voksen pasient diagnostisert med WHO grad IV glioblastoma. Betegnelsen «T1» indikerer at prøven ble hentet ved første kirurgiske tidspunkt, mens «M1» angir den tilsvarende in vitro-modellen avledet fra denne svulsten. Cellelinjen ble generert innenfor HROG-plattformen (Hansestadt Rostock Glioma), som fokuserer på å etablere gliomkulturer med ultralav passasje som bevarer pasientspesifikke molekylære og fenotypiske egenskaper.

HROG17 T1 M1 vokser vedheftende under standard kulturforhold og viser en fibroblastlignende morfologi som er typisk for primære GBM-kulturer. Immunfenotypisk karakterisering av HROG-avledede linjer viser uttrykk for gliale og nevrale linjeassosierte markører som glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestin og vimentin, i samsvar med høygradig astrocyttisk tumoropprinnelse. Molekylær profilering innenfor HROG-samlingen inkluderer evaluering av klinisk relevante parametere som MGMT-promotormetylering, EGFR-amplifikasjonsstatus og mutasjonsanalyse av viktige gener, inkludert TP53, IDH1/2, KRAS og BRAF, som støtter bevaring av tumorspesifikke genomiske endringer i kultur.

HROG17 T1 M1 har blitt brukt til å vurdere følsomhet overfor standardbehandlingsmidler for glioblastom, inkludert alkylerende kjemoterapeutika og ytterligere målrettede forbindelser. Sammenlignende analyser på tvers av HROG-modeller indikerer at kulturer med lav passasje opprettholder stabil morfologi, vekstkinetikk og medikamentresponsprofiler over tidlige passasjer. Som en pasientavledet glioblastom-modell med lav passasje gir HROG17 T1 M1 en klinisk relevant in vitro-plattform for å studere tumorbiologi, terapeutisk respons og intertumoral heterogenitet i høygradig gliom.

Vev
Hjerne
Sykdom
Glioblastom

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
HROG17 T1 M1 (Cytion-katalognummer 300875)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
TrypLE Express, 37 °C, 10 minutter,
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

06Donor

Donorens alder
70 år
Etnisitet
Kaukasisk