Gå direkte til indholdet
HROG17 T1 M1
Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom

Dokumenter

HROG17 T1 M1

Cell line · Varenummer 300875

HROG17 T1 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM)-cellelinje, der er etableret ud fra en tumorprøve, der blev fjernet fra en voksen patient, der var blevet diagnosticeret med WH...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HROG17 T1 M1 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM)-cellelinje, der er etableret ud fra en tumorprøve, der er resekteret fra en voksen patient diagnosticeret med WHO-grad IV glioblastoma. Betegnelsen "T1" angiver, at prøven blev udtaget ved det første kirurgiske tidspunkt, mens "M1" angiver den tilsvarende in vitro-model, der er afledt af denne tumor. Cellelinjen blev genereret inden for HROG-platformen (Hansestadt Rostock Glioma), som fokuserer på at etablere gliomkulturer med ultralav passage, der bevarer patientspecifikke molekylære og fænotypiske egenskaber.

HROG17 T1 M1 vokser vedhæftende under standardkulturforhold og udviser en fibroblastlignende morfologi, der er typisk for primære GBM-kulturer. Immunofenotypisk karakterisering af HROG-afledte linjer viser ekspression af gliale og neurale linjeassocierede markører såsom glial fibrillært surt protein (GFAP), nestin og vimentin, hvilket er i overensstemmelse med højgradig astrocytisk tumoroprindelse. Molekylær profilering inden for HROG-samlingen omfatter evaluering af klinisk relevante parametre såsom MGMT-promotor-methylering, EGFR-amplifikationsstatus og mutationsanalyse af nøglegene, herunder TP53, IDH1/2, KRAS og BRAF, hvilket understøtter bevarelsen af tumorspecifikke genomiske ændringer i kulturen.

HROG17 T1 M1 er blevet brugt til at vurdere følsomheden over for standardbehandlingsmidler til glioblastom, herunder alkylerende kemoterapeutika og yderligere målrettede forbindelser. Sammenlignende analyser på tværs af HROG-modeller indikerer, at kulturer med lav passage opretholder stabil morfologi, vækstkinetik og lægemiddelresponsprofiler i de tidlige passager. Som en patientafledt glioblastom-model med lav passage udgør HROG17 T1 M1 en klinisk relevant in vitro-platform til undersøgelse af tumorbiologi, terapeutisk respons og intertumoral heterogenitet i højgradig gliom.

Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
HROG17 T1 M1 (Cytion katalognummer 300875)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
TrypLE Express, 37°C, 10 min,
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

06Donor

Donorens alder
70 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk