Премини към съдържанието
HROG17 T1 M1
Тъкан
Мозък
Заболяване
Глиобластом

Документи

HROG17 T1 M1

Cell line · Номер на продукта 300875

HROG17 T1 M1 е първична клетъчна линия на мултиформен глиобластома (GBM) при човек, получена от туморна проба, отстранена от възрастен пациент с диагноза WH...

€800.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

HROG17 T1 M1 е първична клетъчна линия на мултиформен глиобластом (GBM) при човека, създадена от туморна проба, резецирана от възрастен пациент, диагностициран с глиобластом от степен IV по класификацията на СЗО. Означението „T1“ показва, че пробата е получена при първата хирургична интервенция, а „M1“ обозначава съответния in vitro модел, получен от този тумор. Клетъчната линия е създадена в рамките на платформата HROG (Hansestadt Rostock Glioma), която се фокусира върху създаването на култури от глиоми с ултраниска пасаж, които запазват специфичните за пациента молекулярни и фенотипни характеристики.

HROG17 T1 M1 расте адхезивно при стандартни условия на култивиране и проявява фибропластоподобна морфология, типична за първични GBM култури. Имунофенотипната характеристика на линиите, произведени от HROG, демонстрира експресия на маркери, свързани с глиалния и невралния произход, като глиален фибриларен киселинен протеин (GFAP), нестин и виментинин, в съответствие с произхода на високостепенен астроцитен тумор. Молекулярното профилиране в колекцията HROG включва оценка на клинично значими параметри, като метилиране на промотора MGMT, статус на амплификация на EGFR и мутационен анализ на ключови гени, включително TP53, IDH1/2, KRAS и BRAF, което подкрепя запазването на тумор-специфични геномни промени в културата.

HROG17 T1 M1 е използван за оценка на чувствителността към стандартни средства за лечение на глиобластома, включително алкилиращи химиотерапевтични средства и допълнителни целеви съединения. Сравнителните анализи на моделите HROG показват, че културите с нисък пасаж поддържат стабилна морфология, кинетика на растежа и профили на реакция към лекарствата през ранните пасажи. Като модел на глиобластома с нисък пасаж, получен от пациент, HROG17 T1 M1 предоставя клинично значима in vitro платформа за изучаване на туморната биология, терапевтичната реакция и междутуморната хетерогенност при високостепенни глиоми.

Тъкан
Мозък
Заболяване
Глиобластом

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Идентификатори

Източник
HROG17 T1 M1 (каталожен номер 300875 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_B7FQ

04Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
TrypLE Express, 37°C, 10 мин,
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме 50% базова среда + 40% FBS + 10% DMSO или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

06Дарител

Възраст на донора
70 години
Етническа принадлежност
Кавказки