Langsung ke isi
HROG17 T1 M1
Tisu
Otak
Penyakit
Glioblastoma

Dokumen

HROG17 T1 M1

Cell line · Nomor produk 300875

HROG17 T1 M1 adalah lini sel glioblastoma multiforme (GBM) manusia primer yang diisolasi dari spesimen tumor yang diangkat dari seorang pasien dewasa yang didiagnosis menderita WH...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

HROG17 T1 M1 adalah garis sel glioblastoma multiforme (GBM) manusia primer yang diisolasi dari spesimen tumor yang diangkat dari pasien dewasa yang didiagnosis menderita glioblastoma grade IV menurut klasifikasi WHO. Penunjukan “T1” menunjukkan bahwa sampel diperoleh pada waktu bedah pertama, sementara “M1” menandakan model in vitro yang dihasilkan dari tumor tersebut. Garis sel ini dihasilkan dalam platform HROG (Hansestadt Rostock Glioma), yang berfokus pada pembentukan kultur glioma dengan jumlah passage ultra-rendah yang mempertahankan karakteristik molekuler dan fenotipik spesifik pasien.

HROG17 T1 M1 tumbuh secara adheren dalam kondisi kultur standar dan menunjukkan morfologi serupa fibroblas yang khas pada kultur GBM primer. Karakterisasi imunofenotipik garis sel yang berasal dari HROG menunjukkan ekspresi penanda terkait garis sel glial dan neural, seperti protein asam fibrillar glial (GFAP), nestin, dan vimentin, sesuai dengan asal tumor astrosit tingkat tinggi. Profiling molekuler dalam koleksi HROG mencakup evaluasi parameter klinis relevan seperti metilasi promotor MGMT, status amplifikasi EGFR, dan analisis mutasi gen kunci termasuk TP53, IDH1/2, KRAS, dan BRAF, mendukung retensi perubahan genomik spesifik tumor dalam kultur.

HROG17 T1 M1 telah digunakan untuk menilai sensitivitas terhadap agen standar perawatan untuk glioblastoma, termasuk kemoterapi alkilasi dan senyawa target tambahan. Analisis perbandingan antar model HROG menunjukkan bahwa kultur dengan jumlah passage rendah mempertahankan morfologi stabil, kinetika pertumbuhan, dan profil respons obat selama passage awal. Sebagai model glioblastoma yang berasal dari pasien dengan jumlah passage rendah, HROG17 T1 M1 menyediakan platform in vitro yang relevan secara klinis untuk mempelajari biologi tumor, respons terapeutik, dan heterogenitas antar tumor pada glioma tingkat tinggi.

Tisu
Otak
Penyakit
Glioblastoma

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Pengidentifikasi

Referensi
HROG17 T1 M1 (Nomor katalog Cytion 300875)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FQ

04Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
TrypLE Express, 37°C, 10 menit,
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan 50% media basal + 40% FBS + 10% DMSO, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

06Donatur

Usia donor
70 tahun
Etnis
Kaukasia