İçeriğe atla
MKN1
Doku
Mide
Hastalık
Adenoskuamöz karsinom
Metastaz yeri
Lenf düğümü
Eş anlamlılar
MKN-1, MKN 1

MKN1

Cell line · Ürün numarası 305589

MKN1, düşük derecede farklılaşmış adenokarsinomlu bir yetişkin hastadan elde edilen bir insan mide kanseri hücre hattıdır. Bu hücre hattı, kanser alanında yaygın olarak kullanılmaktadır...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MKN1, düşük derecede farklılaşmış adenokarsinomlu bir yetişkin hastadan elde edilen bir insan mide kanseri hücre hattıdır. Bu hücre hattı, mide kanserinin ilerlemesini, yayılmasını ve tedavilere verdiği yanıtı modellemede önemli bir rol oynaması nedeniyle kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Kanser metastazında kritik öneme sahip bir süreç olan epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) gösteren mezenkimal benzeri bir morfoloji sergiler. MKN1 hücre hattı, RhoA gibi anahtar proteinlerin orta ila düşük düzeyde eksprese edilmesi ile dikkat çeker; bu da onu, hücre adezyonu ve hareketliliği ile bağlantılı sinyal yolaklarının incelenmesinde vazgeçilmez bir araç haline getirir.

Son araştırmalar, mide kanserinde olası bir kanser kök hücre belirteci olan DCLK1’in (Doublecortin benzeri kinaz 1) rolünün araştırılmasında MKN1’in önemini vurgulamaktadır. MKN1 hücrelerinde DCLK1'in aşırı ekspresyonu, EMT'yi teşvik eder ve hücre göçü ile tümör mikroçevresinin yeniden şekillenmesinde rol oynayan küçük ekstraselüler veziküllerin (sEV'ler) salgılanmasını artırır. DCLK1'i aşırı eksprese eden MKN1 hücrelerinden elde edilen sEV'lerin proteomik analizi, STRAP ve BCAM gibi göç ve yapışmada rol oynayan proteinlerde önemli değişiklikler olduğunu ortaya koymuştur. Ayrıca, DCLK1'in kinaz aktivitesi, bu veziküller içindeki yük proteinlerinin seçimini düzenliyor gibi görünmekte olup, bu da onun bir terapötik hedef olarak potansiyelini vurgulamaktadır.

Ek olarak, MKN1 hücrelerinde RHOA mutasyonu (R129W) ile ilgili çalışmalar, bu mutasyonun CDH1 mutasyonlarından bağımsız olarak hücre göçü ve yapışma yolaklarını değiştirmedeki rolünü ortaya koymuştur. Fonksiyonel analizler, bu mutasyonun RhoA’nın daha yüksek bir aktif GTP-bağlı duruma yol açtığını ve bunun da hücre hareketliliğinin artmasıyla ilişkili olduğunu göstermektedir. Bu bulgular, MKN1’i mide kanseri patogenezinin altında yatan genetik ve moleküler mekanizmaları incelemek ve potansiyel terapötik müdahaleleri test etmek için sağlam bir model olarak konumlandırmaktadır.

Doku
Mide
Hastalık
Adenoskuamöz karsinom
Metastaz yeri
Lenf düğümü
Eş anlamlılar
  • MKN-1
  • MKN 1

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MKN1 (Cytion katalog numarası 305589)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1415

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: TP53, p.Val143Ala (c.428T>C)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri TrypLE Express ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
72 yıl
Etnik köken
Japonca