MKN1

MKN1 est une lignée cellulaire de cancer gastrique humain issue d’un patient adulte atteint d’un adénocarcinome peu différencié. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans la recherche sur le cancer en raison de sa pertinence pour la modélisation de la progression du cancer gastrique, de son invasion et de sa réponse aux traitements. Elle présente une morphologie de type mésenchymateuse, indicative d’une transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), un processus crucial dans la métastase du cancer. La lignée cellulaire MKN1 se distingue par son expression modérée à faible de protéines clés comme RhoA, ce qui en fait un outil essentiel pour l’étude des voies de signalisation liées à l’adhésion et à la motilité cellulaires.

Des recherches récentes soulignent l’importance de la lignée MKN1 dans l’étude du rôle de la DCLK1 (kinase de type doublecortine 1), un marqueur présumé des cellules souches cancéreuses, dans le cancer de l’estomac. La surexpression de DCLK1 dans les cellules MKN1 favorise l’EMT et augmente la sécrétion de petites vésicules extracellulaires (sEV), qui sont impliquées dans la migration cellulaire et le remodelage du microenvironnement tumoral. L’analyse protéomique des sEV issues de cellules MKN1 surexprimant la DCLK1 a permis d’identifier des altérations significatives des protéines impliquées dans la migration et l’adhésion, telles que STRAP et BCAM. De plus, l’activité kinase de la DCLK1 semble réguler la sélection des protéines transportées au sein de ces vésicules, ce qui souligne son potentiel en tant que cible thérapeutique.

Par ailleurs, des études portant sur la mutation RHOA (R129W) dans les cellules MKN1 ont révélé son rôle dans la modification des voies de migration et d’adhésion cellulaires, indépendamment des mutations du gène CDH1. Des essais fonctionnels montrent que la mutation entraîne un état plus actif de RhoA lié au GTP, ce qui est associé à une motilité cellulaire accrue. Ces résultats font de MKN1 un modèle solide pour analyser les mécanismes génétiques et moléculaires sous-jacents à la pathogenèse du cancer de l’estomac et pour tester des interventions thérapeutiques potentielles.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.