MKN1

MKN1 är en mänsklig magcancercellinje som härrör från en vuxen patient med dåligt differentierat adenokarcinom. Denna cellinje används i stor utsträckning inom cancerforskningen tack vare sin relevans för att modellera magcancerns progression, invasion och respons på behandlingar. Den uppvisar en mesenkymliknande morfologi, vilket tyder på epitel-till-mesenkym-övergång (EMT), en process som är avgörande för cancermetastasering. Cellinjen MKN1 utmärks av sin måttliga till låga uttrycksnivå av nyckelproteiner som RhoA, vilket gör den till ett viktigt verktyg för att studera signalvägar kopplade till celladhesion och rörlighet.

Ny forskning belyser vikten av MKN1 för att utforska rollen hos DCLK1 (Doublecortin-like kinase 1), en potentiell markör för cancerstamceller, vid magcancer. Överuttryck av DCLK1 i MKN1-celler främjar EMT och ökar utsöndringen av små extracellulära vesiklar (sEV), vilka är inblandade i cellmigrering och ombildning av tumörens mikromiljö. Proteomisk analys av sEV:er från MKN1-celler med överuttryck av DCLK1 har identifierat betydande förändringar i proteiner som är involverade i migration och adhesion, såsom STRAP och BCAM. Dessutom verkar DCLK1:s kinasaktivitet reglera urvalet av lastproteiner i dessa vesiklar, vilket understryker dess potential som terapeutiskt mål.

Dessutom har studier av RHOA-mutationen (R129W) i MKN1-celler visat att den påverkar cellmigrations- och adhesionsvägarna, oberoende av CDH1-mutationer. Funktionella analyser visar att mutationen resulterar i ett mer aktivt GTP-bundet tillstånd hos RhoA, vilket kopplar den till ökad cellmotilitet. Dessa fynd positionerar MKN1 som en robust modell för att analysera de genetiska och molekylära mekanismerna som ligger till grund för magcancerns patogenes och för att testa potentiella terapeutiska ingrepp.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring