MKN1

MKN1は、低分化型腺癌を患う成人患者から樹立されたヒト胃癌細胞株である。この細胞株は、胃癌の進行、浸潤、および治療への反応をモデル化する上で有用であるため、がん研究で広く利用されている。 この細胞株は間葉系様形態を示しており、これはがんの転移において極めて重要なプロセスである上皮間葉転換（EMT）を示唆している。MKN1細胞株は、RhoAなどの主要タンパク質の発現レベルが中程度から低程度である点が特徴であり、細胞接着や運動性に関連するシグナル伝達経路の研究において不可欠なツールとなっている。

最近の研究では、胃がんにおける推定がん幹細胞マーカーであるDCLK1（ダブルコルチン様キナーゼ1）の役割を解明する上で、MKN1の重要性が浮き彫りになっている。 MKN1細胞におけるDCLK1の過剰発現は、EMTを促進し、細胞遊走や腫瘍微小環境のリモデリングに関与するとされる小細胞外小胞（sEVs）の分泌を増強する。 DCLK1を過剰発現するMKN1細胞由来のsEVのタンパク質体解析により、STRAPやBCAMなど、遊走や接着に関与するタンパク質に著しい変化が確認された。さらに、DCLK1のキナーゼ活性は、これらの小胞内の輸送タンパク質の選別を調節しているようであり、治療標的としての可能性を裏付けている。

さらに、MKN1細胞におけるRHOA変異（R129W）に関する研究により、CDH1変異とは独立して、この変異が細胞の遊走および接着経路を変化させる役割を果たしていることが明らかになった。 機能アッセイにより、この変異がRhoAの活性型GTP結合状態を高め、それによって細胞運動性の増強につながることが示されている。これらの知見により、MKN1細胞は、胃がんの病因の根底にある遺伝的・分子的メカニズムを解明し、潜在的な治療介入を検証するための有力なモデルとして位置づけられている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。