MKN1

MKN1 er en human magekreftcellelinje som stammer fra en voksen pasient med dårlig differensiert adenokarsinom. Denne cellelinjen er mye brukt i kreftforskning på grunn av sin relevans for modellering av magekrefts progresjon, invasjon og respons på behandlinger. Den har en mesenkymlignende morfologi, noe som tyder på epitel-til-mesenkym-overgang (EMT), en prosess som er avgjørende for kreftmetastaser. MKN1-cellelinjen er kjent for sin moderate til lave ekspresjon av nøkkelproteiner som RhoA, noe som gjør den til et viktig verktøy i studiet av signalveier knyttet til celleadhesjon og -motilitet.

Nyere forskning understreker betydningen av MKN1 for å utforske rollen til DCLK1 (Doublecortin-lignende kinase 1), en antatt markør for kreftstamceller, i magekreft. Overekspresjon av DCLK1 i MKN1-celler fremmer EMT og øker utskillelsen av små ekstracellulære vesikler (sEV-er), som er involvert i cellemigrasjon og omforming av tumorens mikromiljø. Proteomisk analyse av sEV-er fra MKN1-celler med overekspresjon av DCLK1 har identifisert signifikante endringer i proteiner involvert i migrasjon og adhesjon, slik som STRAP og BCAM. Videre ser det ut til at DCLK1s kinaseaktivitet regulerer utvalget av lastproteiner i disse vesiklene, noe som understreker dets potensial som et terapeutisk mål.

I tillegg har studier av RHOA-mutasjonen (R129W) i MKN1-celler avdekket dens rolle i å endre cellemigrasjons- og adhesjonsveier, uavhengig av CDH1-mutasjoner. Funksjonelle analyser viser at mutasjonen resulterer i en mer aktiv GTP-bundet tilstand av RhoA, noe som knytter den til økt cellemotilitet. Disse funnene posisjonerer MKN1 som en robust modell for å kartlegge genetiske og molekylære mekanismer som ligger til grunn for patogenesen av magekreft og for å teste potensielle terapeutiske tiltak.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring