MKN1

MKN1 е клетъчна линия от човешки стомашен рак, получена от възрастен пациент с лошо диференциран аденокарцином. Тази клетъчна линия се използва широко в изследванията на рака поради важността ѝ за моделиране на прогресията, инвазията и реакцията на стомашния рак към терапиите. Тя проявява мезенхимноподобна морфология, което е показателно за епително-мезенхимния преход (EMT) – процес, който е от решаващо значение за метастазирането на рака. Клетъчната линия MKN1 се отличава с умерена до ниска експресия на ключови протеини като RhoA, което я превръща в незаменим инструмент при изучаването на сигналните пътища, свързани с клетъчната адхезия и подвижност.

Последните изследвания подчертават важността на MKN1 при проучването на ролята на DCLK1 (Doublecortin-like kinase 1) – предполагаем маркер на раковите стволови клетки – при рака на стомаха. Свръхекспресията на DCLK1 в клетките MKN1 стимулира EMT и засилва секрецията на малки екстрацелуларни везикули (sEVs), които са свързани с клетъчната миграция и преобразуването на туморната микросреда. Протеомният анализ на sEVs от MKN1-клетки с свръхекспресия на DCLK1 е идентифицирал значителни промени в протеините, участващи в миграцията и адхезията, като STRAP и BCAM. Освен това киназната активност на DCLK1 изглежда регулира подбора на протеините-товар в тези везикули, което подчертава потенциала ѝ като терапевтична мишена.

Освен това проучвания, свързани с мутацията RHOA (R129W) в MKN1-клетки, разкриха нейната роля в промяната на пътищата на клетъчната миграция и адхезия, независимо от мутациите в CDH1. Функционалните тестове показват, че мутацията води до по-високо ниво на активно състояние на RhoA, свързано с GTP, което я свързва с повишена клетъчна подвижност. Тези открития позиционират MKN1 като надежден модел за изследване на генетичните и молекулярните механизми, лежащи в основата на патогенезата на рака на стомаха, и за тестване на потенциални терапевтични интервенции.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация