MKN1

A MKN1 é uma linha celular de cancro gástrico humano derivada de um doente adulto com adenocarcinoma pouco diferenciado. Esta linha celular é amplamente utilizada na investigação do cancro devido à sua relevância na simulação da progressão, invasão e resposta do cancro gástrico às terapias. Apresenta uma morfologia de tipo mesenquimal, indicativa de transição epitelial-mesenquimal (EMT), um processo crucial na metástase do cancro. A linha celular MKN1 destaca-se pela sua expressão moderada a baixa de proteínas-chave como a RhoA, tornando-a uma ferramenta essencial no estudo das vias de sinalização associadas à adesão e motilidade celular.

Estudos recentes destacam a importância da MKN1 na exploração do papel da DCLK1 (quinase semelhante à Doublecortin 1), um marcador putativo de células estaminais cancerígenas, no cancro gástrico. A superexpressão de DCLK1 nas células MKN1 promove a EMT e aumenta a secreção de pequenas vesículas extracelulares (sEVs), que estão implicadas na migração celular e na remodelação do microambiente tumoral. A análise proteómica das sEVs provenientes de células MKN1 com superexpressão de DCLK1 identificou alterações significativas nas proteínas envolvidas na migração e adesão, tais como STRAP e BCAM. Além disso, a atividade quinase da DCLK1 parece regular a seleção das proteínas transportadas por estas vesículas, sublinhando o seu potencial como alvo terapêutico.

Além disso, estudos envolvendo a mutação RHOA (R129W) em células MKN1 revelaram o seu papel na alteração das vias de migração e adesão celular, independentemente das mutações no CDH1. Ensaios funcionais demonstram que a mutação resulta num estado mais ativo de RhoA ligado ao GTP, associando-a a uma motilidade celular aumentada. Estas descobertas posicionam o MKN1 como um modelo robusto para a análise dos mecanismos genéticos e moleculares subjacentes à patogénese do cancro gástrico e para o teste de potenciais intervenções terapêuticas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia