Pāriet uz saturu
MKN1
Audums
Kuņģis
Slimība
Adenokvamozā karcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
MKN-1, MKN 1

Dokumenti

MKN1

Cell line · Preces numurs 305589

MKN1 ir cilvēka kuņģa vēža šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša pacienta ar vāji diferencētu adenokarcinomu. Šo šūnu līniju plaši izmanto vēža...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MKN1 ir cilvēka kuņģa vēža šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušā pacienta ar vāji diferencētu adenokarcinomu. Šo šūnu līniju plaši izmanto vēža pētījumos, jo tā ir nozīmīga kuņģa vēža progresēšanas, invāzijas un reakcijas uz terapijām modelēšanā. Tai piemīt mezenhīmalai līdzīga morfoloģija, kas liecina par epitēlija-mezenhīmas pāreju (EMT) — procesu, kas ir izšķirošs vēža metastāžu veidošanā. MKN1 šūnu līnija izceļas ar vidēju līdz zemu tādu galveno proteīnu kā RhoA ekspresiju, tādējādi padarot to par būtisku rīku, pētot signālceļus, kas saistīti ar šūnu adheziju un kustīgumu.

Nesenie pētījumi uzsver MKN1 nozīmi, izpētot DCLK1 (Doublecortin-līdzīgā kināze 1) — iespējama vēža cilmes šūnu marķiera — lomu kuņģa vēža attīstībā. DCLK1 pārmērīgā ekspresija MKN1 šūnās veicina EMT un pastiprina mazo ekstracelulāro vezikulu (sEV) sekrēciju, kurām ir nozīme šūnu migrācijā un audzēja mikrovides pārveidošanā. Proteomiskā analīze sEV no DCLK1 pārmērīgi ekspresējošām MKN1 šūnām ir identificējusi nozīmīgas izmaiņas proteīnos, kas iesaistīti migrācijā un adhezijā, piemēram, STRAP un BCAM. Turklāt šķiet, ka DCLK1 kināzes aktivitāte regulē kravas proteīnu atlasi šajās vezikulās, kas uzsver tās potenciālu kā terapeitisko mērķi.

Turklāt pētījumi, kuros tika izpētīta RHOA mutācija (R129W) MKN1 šūnās, ir atklājuši tās lomu šūnu migrācijas un adhezijas ceļu izmaiņās, neatkarīgi no CDH1 mutācijām. Funkcionālie testi liecina, ka mutācija izraisa RhoA augstāku aktīvo GTP-saistīto stāvokli, saistot to ar pastiprinātu šūnu kustīgumu. Šie atklājumi padara MKN1 par spēcīgu modeli, lai analizētu ģenētiskos un molekulāros mehānismus, kas ir kuņģa vēža patogēnēzes pamatā, un lai pārbaudītu potenciālas terapeitiskas intervences.

Audums
Kuņģis
Slimība
Adenokvamozā karcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
  • MKN-1
  • MKN 1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
MKN1 (Cytion kataloga numurs 305589)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1415

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TP53, p.Val143Ala (c.428T>C)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar TrypLE Express, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
72 gadi
Etniskā piederība
Japāņu