Skip to content
MKN1
Tissue
กระเพาะอาหาร
Disease
มะเร็งชนิดอะดีโนสแควมัส
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
MKN-1, MKN 1

Documents

MKN1

Cell line · Product number 305589

MKN1 is a human gastric cancer cell line derived from an adult patient with poorly differentiated adenocarcinoma. This cell line is widely used in cancer ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

MKN1 เป็นสายเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหารของมนุษย์ ที่ได้มาจากผู้ป่วยผู้ใหญ่ที่มีมะเร็งอะเดโนคาร์ซิโนมาที่มีการแยกตัวต่ำ สายเซลล์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็ง เนื่องจากมีความสำคัญในการจำลองการพัฒนาของมะเร็งกระเพาะอาหาร การรุกราน และการตอบสนองต่อการรักษา มันแสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเซลล์เมเซนคิมา ซึ่งบ่งชี้ถึงการเปลี่ยนผ่านจากเซลล์เยื่อบุสู่เซลล์เมเซนคิมา (EMT) ซึ่งเป็นกระบวนการสำคัญในการแพร่กระจายของมะเร็ง สายเซลล์ MKN1 มีจุดเด่นที่การแสดงออกของโปรตีนสำคัญ เช่น RhoA อยู่ในระดับปานกลางถึงต่ำ ทำให้มันเป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาเส้นทางสัญญาณที่เกี่ยวข้องกับการยึดติดและการเคลื่อนที่ของเซลล์

การวิจัยล่าสุดได้เน้นย้ำถึงความสำคัญของ MKN1 ในการศึกษาบทบาทของ DCLK1 (Doublecortin-like kinase 1) ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้เซลล์ต้นกำเนิดมะเร็งที่คาดการณ์ไว้ ในมะเร็งกระเพาะอาหาร การแสดงออกที่มากเกินไปของ DCLK1 ในเซลล์ MKN1 ส่งเสริมกระบวนการ EMT และเพิ่มการหลั่งของ vesicle นอกเซลล์ขนาดเล็ก (sEVs) ซึ่งเกี่ยวข้องกับการเคลื่อนที่ของเซลล์และการปรับโครงสร้างสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอก การวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์ของ sEVs จากเซลล์ MKN1 ที่มีการแสดงออกของ DCLK1 มากเกินไป ได้ระบุถึงการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการเคลื่อนที่และการยึดติด เช่น STRAP และ BCAM นอกจากนี้ กิจกรรมคินาสของ DCLK1 ดูเหมือนจะควบคุมการเลือกโปรตีนที่บรรจุอยู่ภายในเวสิเคิลเหล่านี้ ซึ่งเน้นย้ำถึงศักยภาพของมันในฐานะเป้าหมายการรักษา

นอกจากนี้ การศึกษาเกี่ยวกับการกลายพันธุ์ของ RHOA (R129W) ในเซลล์ MKN1 ได้เปิดเผยบทบาทของมันในการเปลี่ยนแปลงเส้นทางของการเคลื่อนที่และการยึดติดของเซลล์ โดยไม่ขึ้นอยู่กับการกลายพันธุ์ของ CDH1 การทดสอบทางหน้าที่แสดงให้เห็นว่าการกลายพันธุ์นี้ส่งผลให้ RhoA อยู่ในสถานะที่จับกับ GTP อย่างมีกิจกรรมสูงขึ้น ซึ่งเชื่อมโยงกับการเคลื่อนที่ของเซลล์ที่เพิ่มขึ้น ผลลัพธ์เหล่านี้ทำให้ MKN1 กลายเป็นแบบจำลองที่แข็งแกร่งสำหรับการวิเคราะห์กลไกทางพันธุกรรมและโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเกิดโรคมะเร็งกระเพาะอาหาร และการทดสอบวิธีการรักษาที่เป็นไปได้

Tissue
กระเพาะอาหาร
Disease
มะเร็งชนิดอะดีโนสแควมัส
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
  • MKN-1
  • MKN 1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
MKN1 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305589)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1415

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: TP53, p.Val143Ala (c.428T>C)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย TrypLE Express โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (g) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่บรรจุอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
72 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น