MKN1

MKN1 è una linea cellulare di carcinoma gastrico umano derivata da un paziente adulto affetto da adenocarcinoma scarsamente differenziato. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro grazie alla sua rilevanza nella modellizzazione della progressione del carcinoma gastrico, dell'invasività e della risposta alle terapie. Presenta una morfologia di tipo mesenchimale, indicativa della transizione epiteliale-mesenchimale (EMT), un processo fondamentale nelle metastasi tumorali. La linea cellulare MKN1 si distingue per l’espressione da moderata a bassa di proteine chiave come RhoA, il che la rende uno strumento essenziale nello studio delle vie di segnalazione legate all’adesione e alla motilità cellulare.

Ricerche recenti evidenziano l’importanza della linea cellulare MKN1 nell’esplorazione del ruolo della DCLK1 (chinasi simile alla doublecortina 1), un marcatore putativo delle cellule staminali tumorali, nel cancro gastrico. La sovraespressione di DCLK1 nelle cellule MKN1 favorisce l’EMT e potenzia la secrezione di piccole vescicole extracellulari (sEV), implicate nella migrazione cellulare e nel rimodellamento del microambiente tumorale. L’analisi proteomica delle sEV provenienti da cellule MKN1 che sovraesprimono DCLK1 ha identificato alterazioni significative nelle proteine coinvolte nella migrazione e nell’adesione, quali STRAP e BCAM. Inoltre, l’attività chinasi di DCLK1 sembra regolare la selezione delle proteine cariche all’interno di queste vescicole, sottolineandone il potenziale come bersaglio terapeutico.

Inoltre, studi sulla mutazione RHOA (R129W) nelle cellule MKN1 hanno rivelato il suo ruolo nell’alterazione delle vie di migrazione e adesione cellulare, indipendentemente dalle mutazioni di CDH1. I test funzionali dimostrano che la mutazione determina un maggiore stato attivo di RhoA legato al GTP, collegandolo a una maggiore motilità cellulare. Questi risultati pongono MKN1 come un solido modello per analizzare i meccanismi genetici e molecolari alla base della patogenesi del cancro gastrico e per testare potenziali interventi terapeutici.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia