Preskoči na vsebino
MKN1
Tkivo
Želodec
Bolezen
Adenoskvamozni karcinom
Mesto metastaze
Limfna vozlišča
Sinonimi
MKN-1, MKN 1

Dokumenti

MKN1

Cell line · Številka izdelka 305589

MKN1 je človeška celična linija raka želodca, pridobljena iz odraslega bolnika z slabo diferenciranim adenokarcinomom. Ta celična linija se pogosto uporablja v onkologiji ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

MKN1 je človeška celična linija raka želodca, pridobljena iz odraslega bolnika z slabo diferenciranim adenokarcinomom. Ta celična linija se pogosto uporablja v raziskavah raka zaradi svoje pomembnosti pri modeliranju napredovanja raka želodca, invazije in odziva na terapije. Ima mezenhimalno podobno morfologijo, kar kaže na epitelno-mezenhimalni prehod (EMT), proces, ki je ključen pri metastaziranju raka. Celična linija MKN1 se odlikuje po zmerni do nizki ekspresiji ključnih beljakovin, kot je RhoA, zaradi česar je nepogrešljivo orodje pri preučevanju signalnih poti, povezanih s celično adhezijo in motilnostjo.

Nedavne raziskave poudarjajo pomen MKN1 pri raziskovanju vloge DCLK1 (kinaza 1, podobna Doublecortinu), domnevnega markerja rakovnih matičnih celic, pri raku želodca. Prekomerna ekspresija DCLK1 v celicah MKN1 spodbuja EMT in poveča izločanje majhnih ekstracelularnih veziklov (sEV), ki so vpleteni v migracijo celic in preoblikovanje mikrookolja tumorja. Proteomska analiza sEV iz celic MKN1 s prekomernim izražanjem DCLK1 je pokazala pomembne spremembe v beljakovinah, vpletenih v migracijo in adhezijo, kot sta STRAP in BCAM. Poleg tega se zdi, da kinazna aktivnost DCLK1 uravnava izbor tovornih beljakovin znotraj teh veziklov, kar poudarja njegov potencial kot terapevtskega cilja.

Poleg tega so študije, ki so vključevale mutacijo RHOA (R129W) v celicah MKN1, razkrile njeno vlogo pri spreminjanju poti celične migracije in adhezije, neodvisno od mutacij CDH1. Funkcionalni testi kažejo, da mutacija povzroča višjo stopnjo aktivnega stanja RhoA, vezanega na GTP, kar jo povezuje s povečano celično motilnostjo. Ti izsledki uvrščajo MKN1 med zanesljive modele za raziskovanje genetskih in molekularnih mehanizmov, ki so osnova patogeneze raka želodca, ter za preizkušanje potencialnih terapevtskih posegov.

Tkivo
Želodec
Bolezen
Adenoskvamozni karcinom
Mesto metastaze
Limfna vozlišča
Sinonimi
  • MKN-1
  • MKN 1

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
MKN1 (kataloška številka Cytion 305589)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1415

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: TP53, p.Val143Ala (c.428T>C)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice v celoti prekrijte z raztopino TrypLE Express, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
72 let
Etnična pripadnost
Japonski