MKN1

Az MKN1 egy emberi gyomorrákos sejtvonal, amelyet egy rosszul differenciált adenokarcinómában szenvedő felnőtt betegtől nyertek. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban, mivel alkalmas a gyomorrák progressziójának, inváziójának és a terápiákra adott válaszának modellezésére. Mezenchimális jellegű morfológiát mutat, ami az epiteliális-mezenchimális átalakulásra (EMT) utal, amely folyamat kritikus jelentőségű a rák áttétképződésében. Az MKN1 sejtvonalat az jellemzi, hogy olyan kulcsfontosságú fehérjék, mint a RhoA, mérsékelt vagy alacsony szintű expresszióját mutatja, ami elengedhetetlen eszközzé teszi a sejtadhézióhoz és a sejtmozgáshoz kapcsolódó jelátviteli útvonalak tanulmányozásában.

A legújabb kutatások rávilágítanak az MKN1 fontosságára a DCLK1 (Doublecortin-szerű kináz 1) – egy feltételezett rákos őssejt-marker – gyomorrákban betöltött szerepének feltárásában. A DCLK1 túltermelése az MKN1 sejtekben elősegíti az EMT-t és fokozza a kis extracelluláris vezikulák (sEV-ek) szekrécióját, amelyek szerepet játszanak a sejtvándorlásban és a tumor mikrokörnyezetének átalakulásában. A DCLK1-t túltermelő MKN1-sejtekből származó sEV-ek proteomikai elemzése jelentős változásokat tárt fel a migrációban és az adhézióban részt vevő fehérjékben, például a STRAP-ban és a BCAM-ban. Ezen felül úgy tűnik, hogy a DCLK1 kinázaktivitása szabályozza a szállítófehérjék kiválasztását ezekben a vezikulákban, ami aláhúzza annak potenciálját terápiás célpontként.

Ezen felül az MKN1-sejtekben előforduló RHOA-mutációval (R129W) kapcsolatos vizsgálatok rávilágítottak annak szerepére a sejtvándorlási és adhéziós útvonalak megváltoztatásában, függetlenül a CDH1-mutációktól. Funkcionális vizsgálatok azt mutatják, hogy a mutáció a RhoA magasabb aktív, GTP-hez kötött állapotát eredményezi, ami összefüggésbe hozható a fokozott sejtmozgékonysággal. Ezek az eredmények az MKN1-et megbízható modellként pozícionálják a gyomorrák patogenezisének alapjául szolgáló genetikai és molekuláris mechanizmusok feltárásához, valamint a potenciális terápiás beavatkozások teszteléséhez.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban