MKN1

MKN1 es una línea celular de cáncer gástrico humano derivada de un paciente adulto con adenocarcinoma poco diferenciado. Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer debido a su relevancia para modelar la progresión, la invasión y la respuesta a las terapias del cáncer gástrico. Presenta una morfología de tipo mesenquimal, indicativa de una transición epitelial a mesenquimal (TEM), un proceso fundamental en la metástasis del cáncer. La línea celular MKN1 se destaca por su expresión moderada a baja de proteínas clave como RhoA, lo que la convierte en una herramienta esencial para estudiar las vías de señalización relacionadas con la adhesión y la motilidad celular.

Investigaciones recientes resaltan la importancia de MKN1 para explorar el papel de DCLK1 (quinasa similar a la doublecortina 1), un marcador putativo de células madre cancerosas, en el cáncer gástrico. La sobreexpresión de DCLK1 en las células MKN1 promueve la EMT y potencia la secreción de pequeñas vesículas extracelulares (sEVs), las cuales están implicadas en la migración celular y la remodelación del microambiente tumoral. El análisis proteómico de las sEV de las células MKN1 que sobreexpresan DCLK1 ha identificado alteraciones significativas en proteínas involucradas en la migración y la adhesión, como STRAP y BCAM. Además, la actividad quinasa de DCLK1 parece regular la selección de las proteínas de carga dentro de estas vesículas, lo que subraya su potencial como blanco terapéutico.

Además, estudios sobre la mutación RHOA (R129W) en células MKN1 han revelado su papel en la alteración de las vías de migración y adhesión celular, independientemente de las mutaciones en CDH1. Los ensayos funcionales muestran que la mutación da lugar a un mayor estado activo de RhoA unido a GTP, lo que lo vincula con una mayor motilidad celular. Estos hallazgos posicionan a MKN1 como un modelo sólido para desentrañar los mecanismos genéticos y moleculares subyacentes a la patogénesis del cáncer gástrico y para evaluar posibles intervenciones terapéuticas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.