MKN1

MKN1 er en human mavekræftcellelinje, der stammer fra en voksen patient med et dårligt differentieret adenokarcinom. Denne cellelinje anvendes i vid udstrækning i kræftforskning på grund af dens relevans i modellering af mavekræfts progression, invasion og respons på behandlinger. Den udviser en mesenkymlignende morfologi, hvilket tyder på epitel-til-mesenkym-overgang (EMT), en proces, der er afgørende for kræftmetastaser. MKN1-cellelinjen er kendetegnet ved sin moderate til lave ekspression af nøgleproteiner som RhoA, hvilket gør den til et vigtigt redskab i undersøgelsen af signalveje knyttet til celleadhæsion og -motilitet.

Nyere forskning fremhæver MKN1's betydning for udforskningen af DCLK1's (Doublecortin-lignende kinase 1) rolle – en formodet markør for kræftstamceller – i mavekræft. Overekspression af DCLK1 i MKN1-celler fremmer EMT og øger udskillelsen af små ekstracellulære vesikler (sEV’er), som spiller en rolle i cellemigration og omdannelse af tumorens mikromiljø. Proteomisk analyse af sEV'er fra MKN1-celler med overekspression af DCLK1 har identificeret signifikante ændringer i proteiner, der er involveret i migration og adhæsion, såsom STRAP og BCAM. Desuden ser DCLK1's kinaseaktivitet ud til at regulere udvælgelsen af lastproteiner i disse vesikler, hvilket understreger dets potentiale som et terapeutisk mål.

Derudover har undersøgelser af RHOA-mutationen (R129W) i MKN1-celler afsløret dens rolle i ændringen af cellemigrations- og adhæsionsveje, uafhængigt af CDH1-mutationer. Funktionelle analyser viser, at mutationen resulterer i en højere aktiv GTP-bundet tilstand af RhoA, hvilket knytter den til øget cellemotilitet. Disse fund positionerer MKN1 som en robust model til at analysere de genetiske og molekylære mekanismer, der ligger til grund for mavekræftens patogenese, samt til at teste potentielle terapeutiske interventioner.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring