الانتقال إلى المحتوى
MKN1
الأنسجة
المعدة
المرض
سرطان الغدد اللمفاوية الغدية
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
MKN-1, MKN 1

المستندات

MKN1

Cell line · رقم المنتج 305589

MKN1 هو خط خلوي لسرطان المعدة البشري مستمد من مريض بالغ مصاب بسرطان غدي ضعيف التمايز. ويستخدم هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في مجال السرطان ...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

MKN1 هو خط خلوي لسرطان المعدة البشري مستمد من مريض بالغ مصاب بسرطان غدي ضعيف التمايز. ويستخدم هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في أبحاث السرطان نظراً لأهميته في محاكاة تطور سرطان المعدة، وانتشاره، واستجابته للعلاجات. ويظهر هذا الخط الخلوي شكلاً شبيهاً بالخلايا الوسيطة، مما يشير إلى حدوث الانتقال الظهاري-الوسيطي (EMT)، وهي عملية حاسمة في انتشار السرطان. ويتميز خط الخلايا MKN1 بمستوى تعبير متوسط إلى منخفض لبروتينات رئيسية مثل RhoA، مما يجعله أداة أساسية في دراسة مسارات الإشارة المرتبطة بالالتصاق الخلوي والحركة الخلوية.

تسلط الأبحاث الحديثة الضوء على أهمية MKN1 في استكشاف دور DCLK1 (كيناز شبيه بالدوبلكورتين 1)، وهو علامة محتملة للخلايا الجذعية السرطانية، في سرطان المعدة. يؤدي الإفراط في التعبير عن DCLK1 في خلايا MKN1 إلى تعزيز الانتقال الظهاري-اللحمي (EMT) وزيادة إفراز الحويصلات خارج الخلوية الصغيرة (sEVs)، التي تلعب دورًا في هجرة الخلايا وإعادة تشكيل البيئة المحيطة بالورم. وقد كشف التحليل البروتيني للحويصلات الصغيرة خارج الخلية (sEVs) المستمدة من خلايا MKN1 التي تفرز بروتين DCLK1 بكميات زائدة عن الحد عن تغيرات مهمة في البروتينات المشاركة في الهجرة والالتصاق، مثل STRAP وBCAM. علاوة على ذلك، يبدو أن نشاط كيناز DCLK1 ينظم اختيار البروتينات المحملة داخل هذه الحويصلات، مما يؤكد إمكاناته كهدف علاجي.

بالإضافة إلى ذلك، كشفت الدراسات التي تناولت طفرة RHOA (R129W) في خلايا MKN1 عن دورها في تغيير مسارات هجرة الخلايا والتصاقها، بشكل مستقل عن طفرات CDH1. وتُظهر الاختبارات الوظيفية أن الطفرة تؤدي إلى حالة أعلى من نشاط RhoA المرتبط بـ GTP، مما يربطها بتحسين حركة الخلايا. وتضع هذه النتائج MKN1 كنموذج قوي لتحليل الآليات الجينية والجزيئية الكامنة وراء التسبب في سرطان المعدة واختبار التدخلات العلاجية المحتملة.

الأنسجة
المعدة
المرض
سرطان الغدد اللمفاوية الغدية
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
  • MKN-1
  • MKN 1

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
MKN1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305589)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1415

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: TP53، p.Val143Ala (c.428T>C)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم قم بتغطية الخلايا بالكامل بمادة TrypLE Express باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
72 سنة
الأصل العرقي
ياباني