Prejsť na obsah
MKN1
Tkanivo
Žalúdok
Choroba
Adenoskvamózny karcinóm
Miesto metastáz
Lymfatická uzlina
Synonymá
MKN-1, MKN 1

Dokumenty

MKN1

Cell line · Číslo výrobku 305589

MKN1 je ľudská bunková línia rakoviny žalúdka, získaná od dospelého pacienta s nízko diferencovaným adenokarcinómom. Táto bunková línia sa široko využíva v onkológii...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

MKN1 je ľudská bunková línia rakoviny žalúdka odobratá od dospelého pacienta s nízko diferencovaným adenokarcinómom. Táto bunková línia sa široko využíva vo výskume rakoviny vďaka jej významu pri modelovaní progresie rakoviny žalúdka, invázie a reakcie na liečbu. Vyznačuje sa morfológiou podobnou mezenchýmu, čo svedčí o epiteliálno-mezenchýmovej transformácii (EMT), procese kľúčovom pre metastázovanie rakoviny. Bunková línia MKN1 je známa strednou až nízkou expresiou kľúčových proteínov, ako je RhoA, čo z nej robí nevyhnutný nástroj pri štúdiu signálnych dráh spojených s bunkovou adhéziou a motilitou.

Najnovšie výskumy zdôrazňujú dôležitosť MKN1 pri skúmaní úlohy DCLK1 (Doublecortin-like kinase 1), predpokladaného markera rakovinových kmeňových buniek, pri rakovine žalúdka. Nadmerná expresia DCLK1 v bunkách MKN1 podporuje EMT a zvyšuje sekréciu malých extracelulárnych vezikúl (sEV), ktoré sa podieľajú na migrácii buniek a prestavbe mikroprostredia nádoru. Proteomická analýza sEV z buniek MKN1 s nadmernou expresiou DCLK1 identifikovala významné zmeny v proteínoch podieľajúcich sa na migrácii a adhézii, ako sú STRAP a BCAM. Okrem toho sa zdá, že kinázová aktivita DCLK1 reguluje výber proteínov v týchto vezikulách, čo podčiarkuje jej potenciál ako terapeutického cieľa.

Okrem toho štúdie zamerané na mutáciu RHOA (R129W) v bunkách MKN1 odhalili jej úlohu pri zmene dráh bunkovej migrácie a adhézie, nezávisle od mutácií CDH1. Funkčné testy ukazujú, že táto mutácia vedie k vyššiemu podielu aktívneho stavu RhoA viazaného na GTP, čo súvisí so zvýšenou pohyblivosťou buniek. Tieto zistenia robia z MKN1 spoľahlivý model na skúmanie genetických a molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom patogenézy rakoviny žalúdka, a na testovanie potenciálnych terapeutických intervencií.

Tkanivo
Žalúdok
Choroba
Adenoskvamózny karcinóm
Miesto metastáz
Lymfatická uzlina
Synonymá
  • MKN-1
  • MKN 1

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
MKN1 (katalógové číslo Cytion 305589)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1415

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: TP53, p.Val143Ala (c.428T>C)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne zakryte prípravkom TrypLE Express, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
72 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský