MKN1

MKN1 je lidská buněčná linie rakoviny žaludku odvozená od dospělého pacienta s špatně diferencovaným adenokarcinomem. Tato buněčná linie je široce využívána ve výzkumu rakoviny díky své relevanci při modelování progrese rakoviny žaludku, invaze a reakce na léčbu. Vyznačuje se mezenchymální morfologií, což naznačuje epiteliálně-mezenchymální přechod (EMT), proces zásadní pro metastázování rakoviny. Buněčná linie MKN1 se vyznačuje mírnou až nízkou expresí klíčových proteinů, jako je RhoA, což z ní činí nezbytný nástroj při studiu signálních drah spojených s buněčnou adhezí a motilitou.

Nedávný výzkum zdůrazňuje význam MKN1 při zkoumání role DCLK1 (Doublecortin-like kinase 1), předpokládaného markeru rakovinných kmenových buněk, u rakoviny žaludku. Nadměrná exprese DCLK1 v buňkách MKN1 podporuje EMT a zvyšuje sekreci malých extracelulárních vezikul (sEV), které se podílejí na buněčné migraci a remodelaci mikroprostředí nádoru. Proteomická analýza sEV z buněk MKN1 s nadměrnou expresí DCLK1 identifikovala významné změny u proteinů podílejících se na migraci a adhezi, jako jsou STRAP a BCAM. Navíc se zdá, že kinázová aktivita DCLK1 reguluje výběr transportních proteinů uvnitř těchto vezikul, což podtrhuje její potenciál jako terapeutického cíle.

Studie zaměřené na mutaci RHOA (R129W) v buňkách MKN1 navíc odhalily její roli při změně signálních drah buněčné migrace a adheze, a to nezávisle na mutacích CDH1. Funkční testy ukazují, že tato mutace vede k vyššímu podílu aktivního stavu RhoA vázaného na GTP, což souvisí se zvýšenou buněčnou motilitou. Tyto poznatky činí z MKN1 robustní model pro analýzu genetických a molekulárních mechanismů ležících v základu patogeneze rakoviny žaludku a pro testování potenciálních terapeutických zásahů.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení