Mine otse sisu juurde
MKN1
Kude
Maha
Haigus
Adenoskamoosne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
MKN-1, MKN 1

Dokumendid

MKN1

Cell line · Toote number 305589

MKN1 on inimese maovähi rakuliin, mis on saadud halvasti diferentseeritud adenokartsinoomiga täiskasvanud patsiendilt. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt vähktõve uurimisel ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MKN1 on inimese maovähi rakuliin, mis on saadud halvasti diferentseeritud adenokartsinoomiga täiskasvanud patsiendilt. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, kuna see on oluline maovähi progresseerumise, invasiivsuse ja ravivastuse modelleerimisel. See näitab mesenküümilaadset morfoloogiat, mis viitab epiteel-mesenküüm-üleminekule (EMT), mis on vähimetastaaside tekkimisel otsustava tähtsusega protsess. MKN1 rakuliin paistab silma selliste võtmevalkude nagu RhoA mõõduka kuni madala ekspressiooniga, mis teeb sellest olulise vahendi rakkude adhesiivsusega ja liikuvusega seotud signaaliteede uurimisel.

Hiljutised uuringud rõhutavad MKN1 tähtsust DCLK1 (Doublecortin-like kinase 1) – oletatava vähirakkude tüvirakkude markeri – rolli uurimisel maovähis. DCLK1-i üliekspressioon MKN1-rakkudes soodustab EMT-d ja suurendab väikeste ekstratsellulaarsete vesikulite (sEV-de) sekretsiooni, mis on seotud rakkude rändega ja kasvaja mikrokeskkonda ümberkujundamisega. DCLK1-d üleväljendavate MKN1-rakkude sEV-de proteoomiline analüüs on tuvastanud olulisi muutusi rändes ja adhesiivis osalevates valkudes, nagu STRAP ja BCAM. Lisaks näib, et DCLK1 kinaasiaktiivsus reguleerib nende vesikulite sisaldusvalkude valikut, rõhutades selle potentsiaali terapeutilise sihtmärgina.

Lisaks on MKN1-rakkudes RHOA-mutatsiooni (R129W) käsitlevad uuringud näidanud selle rolli rakkude rändamise ja adhesiiooni signaalradade muutmises, sõltumata CDH1-mutatsioonidest. Funktsionaalsed analüüsid näitavad, et mutatsioon põhjustab RhoA kõrgemal tasemel aktiivset GTP-seotud olekut, seostades seda suurenenud rakkude liikuvusega. Need leiud muudavad MKN1 tugevaks mudeliks maovähi patogeneesi aluseks olevate geneetiliste ja molekulaarsete mehhanismide uurimiseks ning potentsiaalsete ravimeetodite testimiseks.

Kude
Maha
Haigus
Adenoskamoosne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • MKN-1
  • MKN 1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
MKN1 (Cytioni kataloognumber 305589)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1415

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Val143Ala (c.428T>C)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
72 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani